17株水產(chǎn)動(dòng)物病原菌的鑒定.pdf

1、安徽是中國(guó)淡水養(yǎng)殖大省,但長(zhǎng)期以來水產(chǎn)動(dòng)物病原學(xué)研究比較落后,魚、鱉、蟹等水產(chǎn)動(dòng)物的細(xì)菌性傳染病常有發(fā)生,成為制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要因素.近年來,該實(shí)驗(yàn)室先后從省內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)病魚、鱉、蟹等水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)分離到17株細(xì)菌.經(jīng)過初步的常規(guī)鑒定,已確定了其中部分細(xì)菌的種屬.為全面了解安徽省水產(chǎn)動(dòng)物病原流行病學(xué)基本狀況,提供防治水產(chǎn)動(dòng)物傳染病的科學(xué)依據(jù)以及為深入研究病原菌的致病機(jī)理奠定基礎(chǔ),該課題對(duì)17株細(xì)菌的致病性、形態(tài)學(xué)、生理生化特性和分子遺

2、傳學(xué)特性等進(jìn)行了系統(tǒng)研究.首先,應(yīng)用動(dòng)物試驗(yàn)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行了致病性測(cè)定.其次,對(duì)17株細(xì)菌進(jìn)行了形態(tài)學(xué)和生理生化特性表型鑒定.通過涂片、革蘭氏染色、光鏡下檢查,顯示所有待鑒定細(xì)菌均為革蘭氏陰性桿菌.再次,通過測(cè)定DNA G+Cmol﹪含量對(duì)17株病原菌進(jìn)行了分子遺傳學(xué)鑒定.為獲得最佳實(shí)驗(yàn)條件和可靠的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),以標(biāo)準(zhǔn)株大腸桿菌K<,12>為材料,建立和優(yōu)化了測(cè)定G+Cmol﹪含量的Tm法.由于破碎細(xì)菌細(xì)胞壁是提取DNA的關(guān)鍵,間接影響DNAG

3、+Cmol﹪含量的測(cè)定值.因此,研究中比較了SU法(SDS+超聲波)、ES法(溶菌酶+SDS)和ESU法(溶菌酶+SDS+超聲波)破碎大腸桿菌K<,12>細(xì)胞壁在提取染色體DNA和測(cè)定G+Cmol﹪含量中的效果.綜上所述,該研究應(yīng)用API/ATB半自動(dòng)化細(xì)菌鑒定系統(tǒng)和Tm法測(cè)定了17株病原菌的生理生化指標(biāo)和細(xì)菌染色體DNA G+Cmol﹪含量,兩者結(jié)果與《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊(cè)》(第九版)所描述的細(xì)菌特性基本相符,從而確立了17株病原菌的種

4、屬,它們分布于氣單胞菌屬(Aeromonas)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、不動(dòng)桿菌屬(Acinetobacter)、摩根氏菌屬(Morganella)、弧菌屬(Vibrio)和變形桿菌屬(Proteus)6個(gè)菌屬,其中BA<,1>、BA<,3>、BA<,11>HX<,6>和J<,23>5株細(xì)菌為嗜水氣單胞菌(A.hydrophila),BA<,15>、BA<,16>和MA<,1>3株細(xì)菌為溫和氣單胞菌(A.sobria),H