肉雞呼吸道菌群分子生物學分析及芽孢桿菌Pab02噴霧劑的初步應用研究.pdf

1、本文采用三種分子生物學方法(ERIC-PCR-AGE、ERIC-PCR-DGGE和V3-PCR-DGGE)聯合活菌計數法分析肉雞呼吸道菌群結構的多樣性，枯草芽孢桿菌Pab02噴霧劑對肉雞生長性能和呼吸道菌群的影響以及Pab02預防和治療金黃色葡萄球菌感染的效果，結果如下：
　　 1.選取48只7日齡健康肉公雞，隨機分為2組，每組24只，CK組為對照組，P組為噴霧芽孢桿菌Pab02組。P組動物房內每日8時噴霧1ml/m3的Pab0

2、2制劑(10°cfu/ml)，28日齡時對肉雞稱重。結果與CK組相比，P組凈增重提高了9.40g，平均日增重提高了2.68g，全期耗料降低125g，平均日耗料降低5.59g，料肉比降低0.02，但差異性均不顯著(P＞0.05)。結果表明通過噴霧枯草芽孢桿菌Pab02對肉雞的采食量、日增重、料肉比等生長性能有所提高，但無明顯作用。
　　 2.采用活菌計數法和三種分子生物學分析法對28和49日齡肉雞呼吸道細菌結構及多樣性進行檢測，結

3、果，49日齡時呼吸道細菌總數略高于28日齡時；喉部的細菌總數比氣管高一個數量級，喉部細菌總數為106cfu/g，氣管細菌總數為105cfu/g;噴霧Pab02后，喉部細菌數顯著增高(P＜0.05)，氣管細菌數量略有增多(P＞0.05)：49日齡時呼吸道各段的條帶數量顯著多于28日齡(P＜0.05)，兩個日齡段之間呼吸道各段菌群相似性為59％～84％；喉部的條帶數量顯著多于氣管(P＜0.05)，喉與氣管的菌群相似性為60％～84％。說明，

4、肉雞在49日齡時，呼吸道菌群多樣性均顯著高于28日齡時，但兩日齡之間呼吸道菌群相似性仍然很高；喉部的菌群多樣性顯著高于氣管，但兩者之間的菌群相似性仍然很高。噴霧Pab02后，喉部的條帶數顯著增多(P＜0.05)，相似性提高了6～16個百分點；氣管的條帶數量變化不顯著(P＞0.05)，相似性提高了11～16個百分點。說明噴霧Pab02能增加呼吸道細菌數量和多樣性，并能提高菌群的相似性，但是對不同部位的調節(jié)能力不同，對肉雞喉部的調節(jié)作用較大

5、，對氣管的調節(jié)作用較弱。
　　 3.利用金色葡萄球菌G1分別通過滴鼻感染兩組肉雞，然后采用活菌計數和分子生物學方法檢測菌群結構，結果，在感染G1前和后均噴霧Pab02不能顯著改變喉部的細菌總數(P＞0.05)，但能顯著減少氣管中的細菌總數和整個呼吸道(喉部和氣管)中的葡萄球菌數(P＜0.05)；在感染前噴霧Pab02或在感染后噴霧Pab02均不能顯著改變呼吸道中的細菌總數(P＞0.05)，但能顯著減少呼吸道中的葡萄球菌數(P＜0

6、.05)；在感染G1前和后均噴霧Pab02或者僅在感染G1前噴霧Pab02能夠恢復呼吸道菌群多樣性和相似性，而在感染G1后再噴霧Pab02不能恢復呼吸道菌群多樣性和相似性。
　　 4.通過組織學方法觀察噴霧枯草芽孢桿菌Pab02以及滴鼻感染金色葡萄球菌G1后對肉雞肺組織的影響。結果，Pab02噴霧組肺泡正常，未見破裂和融合，未見肺間質增生，未見炎性滲出物，但淋巴小結增多；感染G1后，可見肺泡破裂融合，出血嚴重，炎性細胞大量增多，