遺傳學拓展實驗方案初稿

1、1植物染色體組型分析植物染色體組型分析一、實驗目的一、實驗目的1.學習并掌握根尖處理、染色、壓片及制片觀察的方法。2.觀察有絲分裂各時期染色體的形態(tài)變化，了解有絲分裂全過程。3.觀察分析植物細胞有絲分裂中期染色體的長短、臂比和隨體等形態(tài)特征；學習染色體組型分析的方法。二、實驗原理實驗原理植物根尖的分生細胞的有絲分裂，每天都有分裂高峰時間，此時把根尖固定，經(jīng)過染色和壓片，再置放在顯微鏡下觀察，可以看到大量處于有絲分裂各時期的細胞和染色體。

2、各種生物染色體的形態(tài)、結構和數(shù)目都是相對穩(wěn)定的。每一細胞內(nèi)特定的染色體組成叫染色體組型。染色體組型分析就是研究一個物種細胞核內(nèi)染色體的數(shù)目及各種染色體的形態(tài)特征，如對染色體的長度、著絲點位置、臂比、隨體有無等觀測，從而描述和闡明該生物的染色體組成，為細胞遺傳學、分類學和進化遺傳學等研究提供實驗依據(jù)。染色體組型分析大都采用植物根尖等分生組織的有絲分裂中期細胞，染色體制片要求分裂相為染色體分散，互不重疊，能清楚顯示著絲點位置。然后通過顯微攝

3、影，測量放大照片上的每個染色體的長度和其它形態(tài)特征，依次配對排列，編號，并對各對染色體的形態(tài)特征作出描述。三、實驗材料三、實驗材料1.材料：洋蔥（Aillumcepa）的鱗莖，黑麥，蠶豆（Viciafaba）的種子，2.用具：載玻片，蓋玻片，50ml燒杯，溫度計，恒溫水浴鍋，試劑瓶，鑷子，解剖針，吸水紙，剪刀，繪圖，紙膠水等。3.藥品：Carnoy固定液，70％酒精，酸酒精，0.002M8羥基喹啉，飽和對二氯苯水溶液，秋水仙素，1mol

4、HCl，石碳酸品紅染色液。四、方法與步驟四、方法與步驟（一）植物有絲分裂（一）植物有絲分裂1、材料處理、材料處理先將種子用0.1～0.2%升汞（HgCl2）消毒10分鐘，清水洗凈后，置于2325℃下發(fā)根至0.5cm，再移入0.050.1%秋水仙素溶液，根尖朝下且浸在藥液中，25℃下培養(yǎng)直至根尖膨大。將洋蔥，或黑麥，或蠶豆發(fā)根，待根長到1.52.0cm左右時備用；在分裂高峰期前3h，用0.002M8羥基喹啉，或對二氯苯飽和水溶液，或0.0

5、2％秋水仙素溶液中，預處理3—4h；或放入冰箱(0—4℃)中預處理24h。前處理的作用，主要是阻礙紡錘絲的形成，使染色體縮短，改變細胞質(zhì)的粘度，在壓片時，有利于染色體的分散。2、材料固定、材料固定經(jīng)過前處理的根尖，再放到Carnoy液中固定24h以內(nèi)。固定材料可以轉入70％酒精中，在4℃冰箱中保存，保存時間最好不超過二個月。固定的目的在于將細胞迅速殺死，使細胞結構盡可能保持原來的狀態(tài)。3、材料解離、材料解離方法：從固定液中取出根尖，用蒸

6、餾水漂洗，再放到：①1molLHCl中，在60℃水浴中恒溫解離8—10min；②用95％的酒精∶濃鹽酸＝1∶1的溶液處理8—10min；倒去解離液，再加入固定液5ml，軟化5min，然后倒去固定液，用蒸餾水反復沖洗使3相對長度系數(shù)（I.R.L）=每條染色體的相對長度染色體的平均相對長度⑸染色體組型分類：Stebbins(1971)核型分類表。臂比值＞2的染色體的百分比染色體長度比0.000.010.500.510.991.00＜2：11

7、A2A3A4A2：14：11B2B3B4B＞4：11C2C3C4C染色體長度比＝最長染色體長度最短染色體長度染色體組型類型1A為最對稱型，4C為最不對稱型。⑹染色體組型的公式：芍藥2n=2x=10=8M(2Sat)2SM=6M2SAT2SM⑺染色體組型模式圖：根據(jù)各染色體的相對長度平均值繪制一坐標圖。橫軸上標明各染色體序號，每一染色體與其序號相對應，縱軸表示相對長度值(％)，零點繪在縱軸的中部，并與各染色體的著絲點相對應。此即為該細胞的