北京某大學(xué)本科畢業(yè)論文-整體柱技術(shù)用于蛋白質(zhì)在線富集、除鹽和分離的研究

1、整體柱技術(shù)用于蛋白質(zhì)在線富集、除鹽和分離的研究整體柱技術(shù)用于蛋白質(zhì)在線富集、除鹽和分離的研究目錄目錄第一章第一章緒論緒論......................................................................................................................................11.1蛋白質(zhì)組學(xué)的研究背景與研究內(nèi)容.......

2、..............................................................................11.2基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)研究策略和面臨的挑戰(zhàn).................................................................11.3蛋白質(zhì)樣品處理技術(shù)的發(fā)展.....................................

3、............................................................21.3.1基于色譜技術(shù)的樣品處理方法...........................................................................................31.3.2基于膜技術(shù)和微流控技術(shù)的樣品處理方法..........................

4、........................................31.3.3本組前期工作介紹..........................................................................................................31.3.3.1微電純化裝置（MicroElectricPurificationDevice）的工作原理........

5、...............41.3.3.2MEPD在實(shí)際樣品分析中的應(yīng)用............................................................................51.3.3.3MEPD在分離功能上的不足....................................................................................7

6、1.4毛細(xì)管整體柱在蛋白質(zhì)分離分析中的應(yīng)用.........................................................................71.4.1毛細(xì)管整體柱在毛細(xì)管電色譜分離模式下的應(yīng)用......................................................81.4.2毛細(xì)管整體柱在micro以及nanoHPLC分離模式下的應(yīng)用.........

7、............................91.5本論文選題目的，意義和創(chuàng)新點(diǎn).......................................................................................10第二章第二章MEPD裝置的改進(jìn)及毛細(xì)管整體柱的制備與初步應(yīng)用裝置的改進(jìn)及毛細(xì)管整體柱的制備與初步應(yīng)用...................................

8、............112.1MEPD裝置的改進(jìn)................................................................................................................112.1.1MEPD裝置目前存在的不足之處與改進(jìn)策略.......................................................

9、.....112.1.2實(shí)驗(yàn)儀器和試劑............................................................................................................112.1.3MEPD裝置除鹽功能的表征.........................................................................

10、...............112.2毛細(xì)管整體柱的制備與初步應(yīng)用.......................................................................................122.2.1實(shí)驗(yàn)儀器和試劑.....................................................................................

11、.......................122.2.2毛細(xì)管內(nèi)壁活化、乙烯化方法的優(yōu)化.........................................................................132.2.3毛細(xì)管整體柱聚合反應(yīng)的優(yōu)化.................................................................................

12、...142.2.3.1反相離子交換混合型整體柱的制備及初步應(yīng)用................................................152.2.3.2BMAcoEDMA整體柱的制備及其初步應(yīng)用.....................................................162.3總結(jié)與展望...............................................

13、............................................................................19參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)......................................................................................................................................

14、....21致謝致謝..................................................................................................................................................25整體柱技術(shù)用于蛋白質(zhì)在線富集、除鹽和分離的研究1.2基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)研究策略和面臨的挑戰(zhàn)基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)研究策略和面

15、臨的挑戰(zhàn)生物質(zhì)譜是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)功能，研究蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)之間的相互作用、蛋白質(zhì)DNA和蛋白質(zhì)小分子之間的作用力等方面的重要手段。其最基本的用途是測量多肽、蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子樣品的分子質(zhì)量，以及對其分子結(jié)構(gòu)進(jìn)行推斷。隨著蛋白質(zhì)和多肽分離技術(shù)的不斷創(chuàng)新，質(zhì)譜儀器快速的更新和發(fā)展，生物質(zhì)譜已可以用于非共價(jià)作用的研究，如檢測研究抗體抗原的結(jié)合作用，實(shí)現(xiàn)對蛋白質(zhì)的痕量分析檢測，了解蛋白質(zhì)生成的早期結(jié)構(gòu)域，以及鑒定翻譯后的修飾。在蛋白質(zhì)組學(xué)的研

16、究途徑過程中，越來越多的科學(xué)家認(rèn)識到，蛋白質(zhì)組學(xué)的成功不僅取決于質(zhì)譜儀器本身的發(fā)展，同時(shí)也取決于質(zhì)譜上下游技術(shù)和前段樣品處理技術(shù)的發(fā)展。蛋白質(zhì)等生物大分子樣品中，常常含有難揮發(fā)性鹽、去污劑、基質(zhì)等干擾物，和分析物共流出往往對質(zhì)譜的檢測造成離子抑制，使得目標(biāo)分析物的質(zhì)譜檢測靈敏度大為降低，甚至無法檢出。樣品復(fù)雜基質(zhì)導(dǎo)致的離子抑制問題是生物質(zhì)譜在蛋白質(zhì)組學(xué)研究領(lǐng)域中面對的一大挑戰(zhàn)，因此研究探索快速、高效的蛋白純化富集方法，對推動(dòng)基于質(zhì)譜的蛋

17、白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展非常重要[12]。1.3蛋白質(zhì)樣品處理技術(shù)的發(fā)展蛋白質(zhì)樣品處理技術(shù)的發(fā)展蛋白質(zhì)樣品處理技術(shù)是分離鑒定等其他研究的前提，同時(shí)處理技術(shù)需與分離檢測手段相匹配，如高濃度鹽會(huì)極大抑制HPLC的分離效果，而質(zhì)譜檢測則需要樣品制備時(shí)盡可能除盡難揮發(fā)性鹽，以及各種基底干擾。一般來說，一種理想有效的蛋白質(zhì)樣品前處理方法應(yīng)該滿足以下幾點(diǎn)要求：能夠獲取和富集目標(biāo)蛋白質(zhì)，使其滿足可檢測的需求；根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求不同，有時(shí)還需要去除高豐度蛋白，與檢測目

18、標(biāo)不相干的蛋白質(zhì)，和排除細(xì)胞殘核、磷脂、多糖等其他的干擾分子。對于蛋白質(zhì)等樣品來說，除了要除去不相干的雜質(zhì)以及干擾物質(zhì)以外，由于蛋白質(zhì)樣品還具有種類多、豐度不一、動(dòng)態(tài)范圍寬和物理化學(xué)性質(zhì)多種多樣等繁復(fù)的特點(diǎn)，還要求所制得的樣品盡可能具有較為全備的待測信息，這也是理想的樣品制備方法所應(yīng)具備的效果之一。目前快速發(fā)展的生物質(zhì)譜檢測技術(shù)所關(guān)注的焦點(diǎn)是。樣品處理如何能夠?qū)崿F(xiàn)自動(dòng)化、高效率、高通量、微型化，以及其處理方式如何能夠整合到質(zhì)譜分析策略之