量子點熒光編碼微球的制備及在液相芯片中的應用.pdf

1、基于熒光編碼微球的懸浮微陣列(液相生物芯片)技術具有對同一種樣品中的多種蛋白、細胞因子及基因序列進行同時篩選、定量的能力，在生物識別和疾病診斷等領域具有很高的研究和應用價值。
　　 本文首先以分散聚合方法與種子聚合方法制備了單分散、粒徑可控的羧基化微球，詳細探討了聚合工藝對微球形貌、粒徑大小及分布的影響，通過免疫反應評價了微球的表面反應能力和羧基的活性；其次，以甲苯作為致孔劑，設計制備出不同孔徑的羧基化聚苯乙烯微球，并采用溶劑溶

2、脹逐漸揮發(fā)法與高溫溶脹法分別制備出量子點熒光編碼微球，對量子點熒光編碼微球的性能進行了評價。然后，將溶劑溶脹逐漸揮發(fā)法與高溫溶脹法聯(lián)合使用制備出磁性熒光微球，對磁性熒光微球性能的影響因素進行了詳細的探討；最后初步構建了對量子點熒光編碼微球進行解碼的流式細胞術和基于微流控芯片的光纖光譜儀系統(tǒng)檢測平臺。
　　 實驗結果表明：制備的聚合物微球形貌規(guī)整，粒徑均勻，呈單分散性。FTIR和1HNMR譜圖證實了甲基丙烯酸(MAA)通過共聚的方

3、法被成功引入到了微球上，每個聚合物微球表面富含1.95×105個羧基(MAA為單體含量的5wt％)，免疫反應實驗進一步驗證了微球表面羧基具有良好的反應活性。溶劑溶脹逐漸揮發(fā)法制備的量子點熒光編碼微球性能受到微球孔徑大小的影響，只有合適的孔徑(甲苯含量為75wt％，相對于單體而言)時，熒光微球的熒光強度在PBS能夠保持20天左右，且微球表面羧基能夠用于偶聯(lián)生物分子進行生物檢測；同時，高溫溶脹法制備的熒光微球有效的避免了量子點的泄漏，在不同

4、的pH緩沖溶液中顯示了較強的穩(wěn)定性，且能夠在PBS溶液中儲存2個月以上，其熒光強度沒有明顯變化；免疫反應顯示高溫處理并未影響微球表面的羧基活性。以溶劑溶脹逐漸揮發(fā)法制備出磁性微球后、再用高溫溶脹法將量子點摻雜到微球內部制備的磁性熒光微球具有最好的磁響應性與熒光強度；磁含量在5～15μg/mg時，其相應的熒光信號與磁響應性均具有較高的性能，且分離效率能夠達到99％。以不同粒徑編碼或者是以粒徑與強度混合編碼均能夠被流式細胞儀所識別并區(qū)分為不