量子點熒光編碼微球的制備及在液相芯片中的應(yīng)用.pdf

1、基于熒光編碼微球的懸浮微陣列(液相生物芯片)技術(shù)具有對同一種樣品中的多種蛋白、細(xì)胞因子及基因序列進行同時篩選、定量的能力，在生物識別和疾病診斷等領(lǐng)域具有很高的研究和應(yīng)用價值。
　　 本文首先以分散聚合方法與種子聚合方法制備了單分散、粒徑可控的羧基化微球，詳細(xì)探討了聚合工藝對微球形貌、粒徑大小及分布的影響，通過免疫反應(yīng)評價了微球的表面反應(yīng)能力和羧基的活性；其次，以甲苯作為致孔劑，設(shè)計制備出不同孔徑的羧基化聚苯乙烯微球，并采用溶劑溶

2、脹逐漸揮發(fā)法與高溫溶脹法分別制備出量子點熒光編碼微球，對量子點熒光編碼微球的性能進行了評價。然后，將溶劑溶脹逐漸揮發(fā)法與高溫溶脹法聯(lián)合使用制備出磁性熒光微球，對磁性熒光微球性能的影響因素進行了詳細(xì)的探討；最后初步構(gòu)建了對量子點熒光編碼微球進行解碼的流式細(xì)胞術(shù)和基于微流控芯片的光纖光譜儀系統(tǒng)檢測平臺。
　　 實驗結(jié)果表明：制備的聚合物微球形貌規(guī)整，粒徑均勻，呈單分散性。FTIR和1HNMR譜圖證實了甲基丙烯酸(MAA)通過共聚的方

3、法被成功引入到了微球上，每個聚合物微球表面富含1.95×105個羧基(MAA為單體含量的5wt％)，免疫反應(yīng)實驗進一步驗證了微球表面羧基具有良好的反應(yīng)活性。溶劑溶脹逐漸揮發(fā)法制備的量子點熒光編碼微球性能受到微球孔徑大小的影響，只有合適的孔徑(甲苯含量為75wt％，相對于單體而言)時，熒光微球的熒光強度在PBS能夠保持20天左右，且微球表面羧基能夠用于偶聯(lián)生物分子進行生物檢測；同時，高溫溶脹法制備的熒光微球有效的避免了量子點的泄漏，在不同

4、的pH緩沖溶液中顯示了較強的穩(wěn)定性，且能夠在PBS溶液中儲存2個月以上，其熒光強度沒有明顯變化；免疫反應(yīng)顯示高溫處理并未影響微球表面的羧基活性。以溶劑溶脹逐漸揮發(fā)法制備出磁性微球后、再用高溫溶脹法將量子點摻雜到微球內(nèi)部制備的磁性熒光微球具有最好的磁響應(yīng)性與熒光強度；磁含量在5～15μg/mg時，其相應(yīng)的熒光信號與磁響應(yīng)性均具有較高的性能，且分離效率能夠達到99％。以不同粒徑編碼或者是以粒徑與強度混合編碼均能夠被流式細(xì)胞儀所識別并區(qū)分為不