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1、液相芯片技術(shù)作為一種新興的檢測(cè)技術(shù),相比于傳統(tǒng)的檢測(cè)技術(shù)有很多獨(dú)特優(yōu)點(diǎn),尤其可以實(shí)現(xiàn)快速實(shí)時(shí)高通量檢測(cè),因而近年來(lái)成為臨床診斷領(lǐng)域和生命科學(xué)研究中的一大熱點(diǎn)。作為該技術(shù)的核心材料,熒光編碼微球承擔(dān)著分子識(shí)別和信號(hào)表達(dá)的任務(wù)。目前人類疾病診斷和免疫研究對(duì)熒光編碼微球的種類和數(shù)量有著巨大需求,同時(shí)實(shí)現(xiàn)微球表面的生物分子修飾也是其在生物檢測(cè)領(lǐng)域應(yīng)用的重要條件,因此研究和開發(fā)更多種類的熒光編碼微球及對(duì)其進(jìn)行表面官能團(tuán)修飾具有重要的實(shí)際意義。
2、r> 在以上實(shí)際需求的背景下,本論文先提出一種基于三種不同類型熒光團(tuán)的熒光微球制備方法并通過(guò)調(diào)節(jié)比例改變微球的熒光光譜最終獲得一系列的編碼;然后又制備了一系列基于共軛高分子的表面具有生物分子反應(yīng)位點(diǎn)且顏色可調(diào)的熒光微球并實(shí)現(xiàn)編碼。具體研究?jī)?nèi)容分以下兩個(gè)方面闡述:
?。?)基于三種不同種類的熒光團(tuán)單分散光譜編碼微球的制備
該體系提出一種基于熒光光譜制備編碼微球的策略:將稀土離子銪離子(Eu3+)和有機(jī)染料羅丹明6G(R
3、6G)先分別后共同引入到多孔、單分散且在微米尺寸上的聚合物基質(zhì)微球(SPSDVB)上制備編碼微球。三種不同類型熒光團(tuán)(聚合物熒光團(tuán)SPSDVB、無(wú)機(jī)熒光團(tuán)Eu3+和有機(jī)熒光團(tuán)R6G)的多種組合提供了強(qiáng)大的基于發(fā)射光譜的編碼能力。經(jīng)過(guò)條件優(yōu)化后,我們制備了10種波長(zhǎng)-強(qiáng)度組合的二元編碼微球和15種波長(zhǎng)-強(qiáng)度組合的三元編碼微球。這些組合(或熒光碼)可在同一波長(zhǎng)下激發(fā)。微觀研究表明,其他熒光團(tuán)的引入并未對(duì)基質(zhì)微球的單分散性、尺寸和表面形貌有明
4、顯影響。此外,這些球體對(duì)洗滌和熱處理均有良好的穩(wěn)定性。
?。?)表面帶有反應(yīng)位點(diǎn)且顏色可調(diào)的聚對(duì)亞苯基亞乙烯(PPV)熒光微球的制備
基于本課題組的研究基礎(chǔ),我們合成了帶有羧基側(cè)基的PPV前驅(qū)體(pre-PPVCOO-),經(jīng)實(shí)驗(yàn)條件探索和優(yōu)化后,將其引入到表面帶有氨基和羥基的聚甲基丙烯酸甘油單酯微球(APGMA)上獲得 APGMA-(pre-PPVCOO-)微球;然后進(jìn)行簡(jiǎn)單的熱處理并通過(guò)改變熱消除溫度得到一系列表面具
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