基于SERS方法檢測(cè)的DNA酶生物傳感器的研究.pdf

1、表面增強(qiáng)拉曼散射(SERS)是基于拉曼散射的一種分析表征技術(shù)。由于其靈敏度高、分辨率高、水干擾小、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn),在材料、表面科學(xué)、分析化學(xué)、生物學(xué)、診斷學(xué)等方面都得到了廣泛應(yīng)用。壓電傳感器是高靈敏的一種生物傳感器,具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏、成本低、響應(yīng)譜廣、可實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)輸出等優(yōu)點(diǎn),在生物技術(shù)、臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品工業(yè)、醫(yī)藥和軍事等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。
　　 本文重點(diǎn)關(guān)注如何提高傳感器的檢測(cè)靈敏度等問題,利用納米材料優(yōu)越的信號(hào)

2、放大性能發(fā)展了幾種新型的生物傳感器,通過(guò)SERS技術(shù)對(duì)pb2+,腺苷進(jìn)行了定量檢測(cè),同時(shí)發(fā)展了基于壓電技術(shù)的PDGF-BB生物傳感器。具體包括：在第二章中,發(fā)展了一種基于多層金屬-分子-金屬納米結(jié)的超靈敏的pb2+SERS檢測(cè)方法。本章選用巰基標(biāo)記的GR-5 DNA酶組裝在金電極表面,作為pb2+的特異性識(shí)別探針部分。Pb2+存在時(shí),能夠催化嵌入在該DNA酶底物鏈中RNA堿基的水解,使其被剪切為兩部分。金電極表面剩余的核酸片段部分可以和

3、納米金標(biāo)記的報(bào)告探針鏈雜交,通過(guò)層層自組裝,利用完全互補(bǔ)的兩條DNA鏈間的雜交作用力,納米金之間形成了納米結(jié),標(biāo)記在報(bào)告探針上的拉曼標(biāo)記分子與AuNPs間的距離縮短,拉曼信號(hào)得到顯著增強(qiáng)。該傳感器對(duì)pb2+的檢測(cè)限可達(dá)到1.0×10-10 M。在第二章發(fā)展的方法的基礎(chǔ)上,第三章進(jìn)一步發(fā)展了基于目標(biāo)導(dǎo)致鏈置換型核酸適體SERS傳感器。核酸適體首先與金電極表面的捕獲探針互補(bǔ)雜交被固定在電極表面,當(dāng)腺苷存在時(shí),與核酸適體發(fā)生特異性結(jié)合,導(dǎo)致其

4、構(gòu)型發(fā)生變化,從電極表面脫落。然后,捕獲探針可以和納米金標(biāo)記的報(bào)告探針鏈雜交,同樣通過(guò)層層自組裝形成納米結(jié),從而導(dǎo)致拉曼信號(hào)的顯著增強(qiáng)。該傳感器具有較好的選擇性和較高的靈敏度,檢測(cè)下限為5.0×10-8M。在最后一章中,我們提出了一種簡(jiǎn)便的基于抗體和核酸適體的夾心型壓電免疫傳感器,用于PDGF-BB的檢測(cè)。首先在石英晶振表面通過(guò)偶聯(lián)組裝上抗PDGF-BB抗體,然后待測(cè)物PDGF-BB被晶振表面的抗體特異性結(jié)合,最后結(jié)合納米金標(biāo)記的PDG