

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、目的:壬基酚(nonylphenol,NP)是一種廣泛使用的化工原料,主要用于合成洗滌劑、造紙、紡織印染、皮革化工、乳液聚合、農藥等工業(yè)領域。隨著經濟的飛速發(fā)展,我國每年都有大量的壬基酚通過工業(yè)“三廢”及生活污水進入環(huán)境介質。壬基酚具有擬雌激素活性,是典型的環(huán)境內分泌干擾物。環(huán)境中極低濃度的壬基酚即可通過生物蓄積效應和食物鏈傳遞,潛在危害生物體的內分泌、生殖、免疫、神經等多個系統機能。目前,關于雄性動物成年期壬基酚染毒對生殖器官、性激素
2、水平及精子受精功能影響的研究較少,特別是精子頂體相關指標、附睪抗氧化狀態(tài)及凋亡等方面的研究尚未見報道。本課題通過對成年雄性SD大鼠灌胃染毒,研究壬基酚對大鼠睪丸、附睪和精子的損傷作用,探討其對雄性大鼠生殖功能的影響及其可能的毒作用機制。
方法:32只健康成年SPF級雄性SD大鼠,經適應性飼養(yǎng)1周后,按體重隨機分為4組:溶劑對照組(玉米油)和低(40mg/kg)、中(100mg/kg)、高劑量(250mg/kg)壬基酚染毒組,每
3、組8只。從大鼠12周齡開始,采取灌胃方式染毒,容量1.5ml/kg,隔天上午染毒1次,連續(xù)90d。(1)一般狀況及體重:每日觀察動物的飲食和活動情況,注意大鼠被毛、皮膚、眼睛、呼吸以及日常行為方面的變化。隔天稱重一次;(2)大鼠處死后,分離雙側睪丸、附睪和附睪尾,稱重,并計算相應的臟器系數;(3)蘇木素-伊紅(HE)染色,觀察大鼠睪丸組織病理學改變;(4)腹主動脈采血,分離血清,酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清睪酮水平;(5)制備附
4、睪尾精子懸液,利用光學顯微鏡及活細胞工作站,計數精子濃度、畸形率和活動度;(6)通過使用相應熒光探針和流式細胞技術檢測精子存活率、頂體完整性、線粒體膜電位(MMP)和游離鈣離子([Ca2+]i)水平;(7)采用改良Kenndy法檢測精子頂體酶活性;(8)通過流式細胞儀和熒光染料(H2DCFDA)檢測附睪尾精子活性氧(ROS)水平;(9)利用酶聯免疫吸附法檢測附睪組織抗氧化物酶((超氧化物歧化酶,SOD)和(過氧化氫酶,CAT))活性;(
5、10)使用TUNEL法評估壬基酚對附睪凋亡誘導效應。
結果:(1)染毒后,各劑量壬基酚染毒組大鼠均出現精神萎靡、稀便、被毛不舒展、毛發(fā)灰暗甚至脫毛現象,組間差異不明顯。高劑量組大鼠在灌胃時反抗較強烈,攻擊性行為在染毒后期明顯增強。各染毒組大鼠體重與溶劑對照組比較,差異均無統計學意義。(2)與溶劑對照組比較,僅低、高壬基酚染毒組大鼠的附睪重量顯著下降。各染毒組大鼠睪丸、附睪和附睪尾的臟器系數與溶劑對照組比較,差異均無統計學意義。
6、(3)病理學檢查發(fā)現,溶劑對照組大鼠睪丸曲細精管排列緊密、結構完整,生精上皮基膜完整,各級生精細胞層排列規(guī)則、層次清楚;低劑量壬基酚染毒組曲細精管結構相對規(guī)則、大小一致,管間隙略有增大,生精細胞層基本完整;中、高劑量壬基酚染毒組睪丸出現部分曲細精管萎縮、管間隙增大,生精細胞層變薄、結構排列紊亂,管腔內精子細胞數量減少,部分管腔可見脫落的上皮細胞碎片。(4)與溶劑對照組比較,低劑量壬基酚染毒組大鼠血清睪酮水平略有升高,中、高劑量組睪酮水平
7、有所降低,但僅高劑量組睪酮水平降低明顯,差異有統計學意義。(5)附睪尾精子計數、活動度隨著染毒劑量的增加而逐漸降低,而精子畸形率隨著染毒劑量的增加而逐漸升高。與溶劑對照組比較,中、高劑量壬基酚染毒組大鼠附睪尾精子數量顯著減少、活動度顯著降低、畸形率顯著增加。(6)流式細胞儀檢測結果顯示,與溶劑對照組比較,中、高劑量壬基酚染毒組精子的(PI-/PNA+)%明顯升高;高劑量壬基酚染毒組大鼠精子hMMP%顯著降低;各劑量壬基酚染毒組大鼠精子存
8、活率和[Ca2+]i水平均無明顯變化;隨壬基酚染毒劑量的升高,精子頂體完整性和MMP的水平呈逐漸降低的趨勢。(7)與溶劑對照組比較,高劑量壬基酚染毒組精子的頂體酶活力下降,差異有統計學意義;隨著壬基酚染毒劑量的升高,精子頂體酶活力呈逐漸降低的趨勢。(8)與溶劑對照組比較,壬基酚染毒組大鼠精子細胞內ROS水平均有所升高,但僅高劑量組精子 ROS顯著升高。(9)與溶劑對照組比較,壬基酚染毒組大鼠附睪組織SOD和CAT活性均有所下降,其中低、
9、高劑量組CAT活性以及高劑量組SOD活性均顯著下降。(10)TUNEL檢測結果顯示:各組大鼠附睪組織均見凋亡陽性信號表達,且凋亡細胞主要是退化的附睪管上皮細胞,位于附睪管基底部;與溶劑對照組比較,低、高劑量壬基酚染毒組大鼠附睪組織凋亡陽性細胞百分比顯著升高;高劑量組附睪組織凋亡陽性細胞顯色強度呈強陽性,其余劑量組凋亡陽性細胞顯色強度呈陽性。
結論:(1)壬基酚于大鼠成年期在體暴露,可使附睪重量明顯下降,提示壬基酚對附睪組織存在
10、損害作用;同時壬基酚染毒對大鼠體重和睪丸重量則未顯現出明顯的影響。(2)組織病理學檢查提示,隨壬基酚染毒劑量的增加,睪丸曲細精管損傷程度逐漸加重。(3)壬基酚可導致血清睪酮水平明顯降低,提示壬基酚能擾亂內分泌激素水平,從而對雄性生殖系統產生毒性作用。(4)壬基酚暴露可使大鼠附睪尾精子數量顯著減少、畸形率顯著增加,提示壬基酚可能造成成年雄性生精障礙。(5)壬基酚暴露可影響精子活動度、MMP、頂體完整性及頂體酶活性,表明壬基酚對精子受精功能
11、具有一定損傷作用;但是壬基酚對精子存活率和[Ca2+]i沒有明顯的影響作用,提示 NP對精子受精功能的影響可能不是通過改變[Ca2+]i水平而發(fā)揮作用的。(6)壬基酚暴露可升高大鼠附睪尾精子ROS水平,造成精子氧化應激增加。提示,壬基酚所致精子ROS增加可能是影響精子受精功能的機制之一。(7)壬基酚暴露可影響附睪組織SOD和CAT活性,也可誘導附睪組織發(fā)生凋亡。提示壬基酚對附睪組織具有一定毒性,可能是造成臟器重量降低及精子功能變化的原因
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 壬基酚對雄性生殖系統的潛在危害.pdf
- 壬基酚對成年雌性SD大鼠生殖功能的影響.pdf
- 壬基酚和大豆異黃酮對雄性大鼠生殖系統的潛在危害.pdf
- 壬基酚對SD大鼠胰腺功能的影響.pdf
- 壬基酚對雄性大鼠生殖功能危害的作用機制研究.pdf
- 雙酚A對成年雄性大鼠生殖系統的影響.pdf
- 壬基酚對雌性SD大鼠免疫系統功能影響的研究.pdf
- 孕期暴露壬基酚對雄性仔鼠生殖及免疫功能的影響.pdf
- 壬基酚對成年SD大鼠胰腺功能的影響.pdf
- 孕期暴露壬基酚和雌二醇對F1雄性大鼠生殖系統的聯合作用.pdf
- 雙酚A對成年雄性大鼠生殖系統蛋白乙?;揎椀挠绊?pdf
- 急性微波輻射對雄性成年大鼠生殖系統的影響研究.pdf
- 雙酚A對SD大鼠雄性生殖發(fā)育毒性及機制的研究.pdf
- 壬基酚雄性生殖發(fā)育毒性機理研究.pdf
- 奧硝唑對雄性大鼠生殖系統的作用機制研究.pdf
- 次聲對雄性大鼠生殖系統的影響及藥物防護研究.pdf
- 芹菜素對雄性小鼠生殖系統影響的研究.pdf
- 五溴聯苯醚對SD大鼠生殖系統結構和功能的影響及其機制的研究.pdf
- 電刺激骶神經對脊髓損傷雄性大鼠生殖系統影響的研究.pdf
- 芹菜對雄性小鼠生殖系統影響機制的研究.pdf
評論
0/150
提交評論