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文檔簡介
1、目的:基于定量模式活性關系分析法快速篩選亞貢葉的抗氧化活性成分及成分群。
方法:⑴采用70%乙醇對亞貢葉進行回流提取得粗提物,以溶液萃取法把粗提取物分離成石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水相提取物4部分。以活性較高的乙酸乙酯提取物為研究對象,采用正相硅膠色譜柱分離得17個部位,并建立HPLC-DAD方法對乙酸乙酯提取物及17個部位進行分析得色譜圖及光譜圖,隨后以DPPH自由基清除試驗評價各部位抗氧化活性。⑵結合乙酸
2、乙酯提取物及17個部位譜圖及抗氧化活性數(shù)據(jù),基于定量模式分析法,結合模型群體分析、優(yōu)劣比分析法和權重分析法快速篩選出乙酸乙酯提取物中高抗氧化活性成分及活性成分群,以柱色譜分離制備活性成分及成分群,最后再進行活性試驗以驗證篩選模型的可靠性。
結果:①乙酸乙酯提取物及17個部位的DPPH自由基活性清除試驗結果初步顯示5-8號樣品自由基清除活性最高,5號樣品明顯高于陽性對照二丁基羥基甲苯(Butylated hydroxytolue
3、ne, BHT)(P<0.05)。②定量模式活性關系分析預測結果顯示保留時間為2-12 min、53-64 min部位活性成分群及保留時間為3、3.6、5.7、7.6、11.7、18.6、20.9 min等化合物為活性成分。以正、反相柱色譜技術對活性成分群及活性成分進行制備并采用核磁共振技術分析所得單體結構。結果表明得到的化合物分別為Uvedalin、咖啡酸乙酯、咖啡酸甲酯、Enhydrin、高圣蘭酚、3,7-二甲基醚槲皮素、Uveda
4、folin和綠原酸。其中咖啡酸乙酯、咖啡酸甲酯、高圣蘭酚、3,7-二甲基醚槲皮素和綠原酸是模型預測的高活性成分,DPPH自由基清除試驗活性驗證結果顯示,預測的活性化合物活性高于陽性對照BHT、陰性對照品和活性最高的5號樣品,證明篩選數(shù)據(jù)可靠?;钚猿煞秩海ūA魰r間為2-12 min)活性高于其中單體化合物活性,說明組分群中各成分存在協(xié)同作用。
結論:亞貢葉富含抗氧化活性成分,以定量模式活性關系分析法篩選所得結果可靠,該方法有望用
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