白紋伊蚊細(xì)菌微生物群多樣性及功能研究.pdf

1、研究背景:
　　白紋伊蚊是登革病毒、寨卡病毒等人類病原的重要傳播媒介，是一種適應(yīng)性和侵襲性很強(qiáng)的蚊種，是中國登革熱傳播流行的“罪魁禍?zhǔn)住?。蚊媒種群控制是目前登革熱防控的唯一有效途徑。微生物菌群與生物多方面功能息息相關(guān)，然而關(guān)于細(xì)菌在蚊蟲生長、發(fā)育和繁殖過程中的作用知之甚少。了解白紋伊蚊及其孳生地細(xì)菌微生物菌群對蚊蟲的作用和影響將有助于開發(fā)控制媒介種群及相關(guān)疾病新方法。
　　研究目的:
　　本課題擬探討孳生地水體中細(xì)菌微

2、生物菌群的多樣性，細(xì)菌微生物菌群對白紋伊蚊幼蟲的生長、發(fā)育的影響及Wolbachia共生菌與成蚊細(xì)菌菌群的相互作用。
　　研究方法:
　　1.利用半野外條件下生命表的方法研究幼蟲孳生地水體中微生物種群對白紋伊蚊幼蟲的生長發(fā)育的影響;
　　2.通過Miseq(@)16S rRNA基因V4高變區(qū)高通量測序的技術(shù)檢測白紋伊蚊實(shí)驗(yàn)室株和野外株孳生地水體，幼蟲和成蚊的微生物種群多樣性及動(dòng)態(tài);研究影響蚊蟲細(xì)菌多樣性的因素;

3、　　3.通過高通量測序技術(shù)研究白紋伊蚊Wolbachia自然感染和新增外源感染對蚊蟲細(xì)菌微生物的影響。
　　研究結(jié)果:
　　1.生命表研究結(jié)果表明白紋伊蚊實(shí)驗(yàn)室株在富含細(xì)菌的自然水體的存活率為6％，而于添加抗生素除去細(xì)菌的水體中為0，表明孳生地水體菌群對于幼蟲的生長發(fā)育具有不可或缺的重要作用;
　　2.16S rRNA高通量測序結(jié)果表明孳生地水體中微生物種群多樣性較高，不同的孳生地類型中細(xì)菌種類有很大的差別。蚊蟲幼蟲的

4、細(xì)菌微生物種群多樣性與孳生地水體密切相關(guān);在成蚊中則隨著蚊齡的增長而降低。孳生地水體的細(xì)菌微生物對幼蟲體內(nèi)微生物多樣性無顯著影響，但與成蚊細(xì)菌微生物的組成有明顯不同;
　　3.白紋伊蚊實(shí)驗(yàn)室株和野生株中Wolbachia含量隨著蚊齡增長而增高。qPCR結(jié)果表明WolbachiaA(wAlbA)和B(wAlbB)菌株是主要的組成，其中wAlbB是優(yōu)勢的菌株;
　　4.白紋伊蚊去除Wolbachia或新增外源感染都都會(huì)使白紋伊蚊

5、細(xì)菌微生物的菌群組成發(fā)生顯著變化，多樣性增大。
　　結(jié)論:
　　孳生地水體的細(xì)菌微生物對于白紋伊蚊幼蟲的生長和發(fā)育具有不可或缺的作用。幼蟲孳生地的細(xì)菌微生物多樣性對于幼蟲細(xì)菌微生物具有顯著影響。Wolbachia是成蚊細(xì)菌菌群的主要成分;去除或者加入外源Wolbachia對蚊蟲中腸細(xì)菌微生物菌群有明顯的影響。該研究展示了環(huán)境中的細(xì)菌及體內(nèi)共生菌對白紋伊蚊的生長、發(fā)育和繁殖有重要作用，為研究蚊蟲細(xì)菌微生物的功能及基于細(xì)菌微生物