血漿miR-146a在糖尿病性視網(wǎng)膜病變不同分期的表達.pdf

1、微小RNA（microRNA）是一類長度大約22個堿基，在進化中高度保守的非蛋白質(zhì)編碼的內(nèi)源性小分子RNA。它是一種具有強大調(diào)節(jié)作用的新型基因分子。microRNA可以在所有細(xì)胞類型中表達，在細(xì)胞的生長、分化、凋亡中均參與其中。作為一個重要的微小RNA，miR-146家族在各種生理及病理過程中參與重要的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)已經(jīng)被廣泛報道。miR-146a在糖尿病性視網(wǎng)膜病變的過程中的表達變化也有相關(guān)的報道。根據(jù)文獻報道不能確定miR-146a在糖

2、尿病性視網(wǎng)膜病變的表達變化情況。
　　目的：
　　本研究通過對糖尿病性視網(wǎng)膜病變的不同分期miR-146a表達進行對比，初步研究糖尿病性視網(wǎng)膜病變的分期同miR-146a表達變化的關(guān)系，探討miR-146a能否成為糖尿病性視網(wǎng)膜病變的診斷工具。
　　方法：
　　1.對已確診的2型糖尿病患者根據(jù)眼底病變的情況進行分類，從0期至Ⅳ分為5組，共33例，排除眼底病變不同各組患者無差異。同時選取健康人對照組。對目的組及對照

3、組進行靜脈采血。
　　2.分離靜脈血，利用試劑盒提取標(biāo)本血漿中的 microRNA。對取得microRNA利用PloyA進行加尾，并對加尾的產(chǎn)物進行反轉(zhuǎn)錄。采用實時熒光定量PCR法檢測樣本miR-146a的相對表達含量。
　　3.對實時熒光定量 PCR的產(chǎn)物進行電泳檢測，驗證所得到的產(chǎn)物是否為目的產(chǎn)物。
　　4.統(tǒng)計學(xué)整理數(shù)據(jù)，應(yīng)用統(tǒng)計學(xué)軟件 SPSS19.0處理數(shù)據(jù)，采用單因素方差分析實驗結(jié)果。
　　結(jié)果：

4、r>　　1.根據(jù)電泳結(jié)果分析，熒光定量 PCR的產(chǎn)物在目的條帶范圍，符合實驗要求。證明引物具有特異性。
　　2.溶解曲線和擴增曲線結(jié)果也證明引物的特異性好，符合實驗要求。引物的擴增效率同樣在可信區(qū)間范圍內(nèi)。
　　3.統(tǒng)計學(xué)分析miR-146a的相對表達含量，將糖尿病性視網(wǎng)膜病變的0期與健康對照組相比，血漿 miR-146a的表達水平有升高趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。糖尿病性視網(wǎng)膜病變Ⅰ~Ⅳ期分別與健康對照組相比，m

5、iR-146a的表達水平有下降趨勢，但無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。糖尿病性視網(wǎng)膜病變各分期之間差異無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1.本實驗檢測miR-146a表達在糖尿病視網(wǎng)膜病變各組之間，目的組與對照組之間，未能得出統(tǒng)計學(xué)差異，尚不能確認(rèn)miR-146a在糖尿病視網(wǎng)膜病變的表達情況。
　　2.不同糖尿病患者及健康人之間miR-146a表達的個體差異較大。
　　3.在本研究所檢測的樣本中未能體