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1、開(kāi)發(fā)高通量、高靈敏度和高特異性的免疫檢測(cè)方法是生物檢測(cè)和臨床診斷的迫切需求,基于主客體結(jié)構(gòu)的微球(beads on beads,BOBs)因其具有獨(dú)特的多元微納結(jié)構(gòu)與提高的可反應(yīng)比表面積而成為一類(lèi)非常有應(yīng)用價(jià)值的新型載體材料。探究這類(lèi)載體微球表面精細(xì)微觀結(jié)構(gòu)對(duì)固載其表面的生物分子活性影響的規(guī)律和作用機(jī)制對(duì)開(kāi)發(fā)高性能生物載體非常重要。
本研究首先設(shè)計(jì)并可控制備了具有精密表面結(jié)構(gòu)的三類(lèi)載體微球,一種是表面光滑的羧基光滑微球(MPC
2、),另外兩種為主客體結(jié)構(gòu),但表面功能基團(tuán)分布狀態(tài)不同的BOBs微球。其次,以上述三類(lèi)微球?yàn)檩d體,采用酶聯(lián)免疫檢測(cè)方法(ELISA)探究固載在上述三類(lèi)微球表面的抗體識(shí)別免疫復(fù)合物的能力,從而揭示BOBs載體微球的表面精細(xì)結(jié)構(gòu)對(duì)固載其表面的蛋白的生物活性的影響規(guī)律與作用機(jī)制?;诖四康模疚氖紫确謩e利用羧基氧化硅納米顆粒和氨基磁性聚苯乙烯微球(MPs)為客體子球與主體母球,通過(guò)EDC/NHS活化法制備得到了表面具有類(lèi)樹(shù)梅形貌、具有微納精細(xì)結(jié)
3、構(gòu)且主體微球表面功能基團(tuán)為氨基的BOBs微球(SCMPN),并在SCMPN基礎(chǔ)上通過(guò)表面羧基修飾制備得到了主、客體微球表面功能基團(tuán)均為羧基的BOBs微球(SCMPC)。然后,分別研究了三種微球的基本理化性能,并以抗hCG抗體為模式研究對(duì)象,將抗α-hCG抗體共價(jià)荷載在上述三類(lèi)微球表面,采用ELISA檢測(cè)與流式熒光免疫檢測(cè)兩種典型的分析系統(tǒng),分別研究他們?cè)赑BS緩沖體系和血清體系中識(shí)別免疫復(fù)合物的能力。結(jié)果表明抗體分子結(jié)合于SCPMN表面
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