藥物保留灌腸防治SD大鼠急性放射性直腸炎預(yù)防慢性放射性直腸炎的研究.pdf

1、目的:通過建立SD大鼠放射性直腸炎模型，研究消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺、美沙拉嗪保留灌腸能否防治急性放射性直腸炎，預(yù)防慢性放射性直腸炎并探索其機(jī)制。
　　方法:1、建立SD大鼠放射性直腸炎模型1）照射方法:采用6MV-X射線局部單次大劑量照射的方法建立SD大鼠放射性直腸炎模型，SD大鼠60只，隨機(jī)分為6組，每組10只，照射劑量分別為0Gy、17.5Gy、20Gy、22.5Gy、25Gy、27.5Gy，大鼠麻醉后仰臥體位固定，照射范

2、圍自恥骨聯(lián)合至肛門，照射野面積約3×4cm，源皮距100cm，劑量率400cGy/min。2）觀察指標(biāo)(1)照射后每日觀察大鼠一般征象:進(jìn)食、飲水量、排便、自主活動(dòng)、肛周脫毛、出血等，評(píng)分記錄。(2)照射后7d、14d各組隨機(jī)抽取5只大鼠麻醉，取血標(biāo)本后處死，取直腸組織，HE染色，光鏡觀察直腸組織病理改變。3）模型評(píng)價(jià)大鼠一般情況:進(jìn)食、飲水量下降，出現(xiàn)中度稀便、粘液便、血便等排便異常，直腸病理改變?yōu)橹兄囟妊装Y改變，則為造模成功。2、藥

3、物保留灌腸療效評(píng)價(jià)及機(jī)制研究1）分組及用藥:將225只大鼠隨機(jī)分為5組，每組45只，正常對(duì)照組:未照射+NS灌腸，陰性對(duì)照組:照射+NS灌腸，陽性對(duì)照組:照射+思密達(dá)、慶大霉素、地塞米松灌腸，復(fù)方灌腸1號(hào)組:照射+消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺灌腸，復(fù)方灌腸2號(hào)組:照射+消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺、美沙拉嗪灌腸，照射后1～14d每天同一時(shí)段保留灌腸。2）觀察方法及內(nèi)容:(1)照射后每日觀察大鼠一般征象:進(jìn)食、飲水量、排便、自主活動(dòng)、肛周脫毛

4、、出血等，評(píng)分記錄。(2)照射后1W、2W、4W、6W、8W、10W、12W、14W、16W各組隨機(jī)抽取5只大鼠麻醉后取血標(biāo)本后處死，取直腸組織，HE染色，光鏡觀察直腸組織病理改變變化。(3)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)各組大鼠血清中白細(xì)胞介素-6(IL-6)、白細(xì)胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)水平。
　　結(jié)果:1、放射性直腸炎模型建立(1)盆腔局部照射給大鼠直腸造成損傷，引起放射性直腸炎，照射劑量增

5、加損傷程度增大，一般征象、病理評(píng)分增高。(2)25Gy組符合造模成功標(biāo)準(zhǔn)，選25Gy為建立放射性直腸炎模型的照射劑量。2、藥物保留灌腸療效評(píng)價(jià)及機(jī)制研究1）據(jù)實(shí)驗(yàn)病理改變提示急性期約為照射后1～4W，亞急性期約為照射后5～11W，慢性期約為照射后12W及以后。2）急慢性放射性直腸炎發(fā)病率(1)陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組、復(fù)方灌腸1號(hào)組、復(fù)方灌腸2號(hào)組的急性放射性直腸炎發(fā)病率分別為95.56％、91.11％、88.89％、86.67％，陽性對(duì)

6、照組、復(fù)方灌腸1、2號(hào)組的發(fā)病率與陰性對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。藥物保留灌腸并未降低急性放射性直腸炎的發(fā)病率。(2)陰性對(duì)照組、陽性對(duì)照組、復(fù)方灌腸1號(hào)組、復(fù)方灌腸2號(hào)組12W后各組總的慢性放射性直腸炎發(fā)病率分別為40％、20％、13.33％、6.67％，復(fù)方灌腸2號(hào)組的慢性放射性直腸炎發(fā)病率與陰性對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，提示復(fù)方灌腸2號(hào)組可有效地降低慢性放射性直腸炎發(fā)病率。3）一般征象評(píng)分:陽性對(duì)照組、復(fù)

7、方灌腸1號(hào)組、復(fù)方灌腸2號(hào)組與正常對(duì)照組、陰性對(duì)照組比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，提示藥物保留灌腸可有效地治療急性放射性直腸炎，減輕急性、亞急性、慢性期大鼠的癥狀。復(fù)方灌腸1、2號(hào)組與陽性對(duì)照組比較，總體上有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示復(fù)方灌腸1、2號(hào)組防治放射性直腸炎的療效優(yōu)于陽性對(duì)照組。復(fù)方灌腸1、2號(hào)組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但各時(shí)間點(diǎn)評(píng)分復(fù)方灌腸2號(hào)組均低于復(fù)方灌腸1號(hào)組，提示復(fù)方灌腸2號(hào)組療效可能更佳。4）病理評(píng)分陽

8、性對(duì)照組、復(fù)方灌腸1號(hào)組、復(fù)方灌腸2號(hào)組與正常對(duì)照組、陰性對(duì)照組比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示藥物保留灌腸可有效地治療急性放射性直腸炎，減輕急性、亞急性、慢性期放射性直腸炎的炎癥、損傷、分級(jí)程度。復(fù)方灌腸1、2號(hào)組與陽性對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示復(fù)方灌腸1、2號(hào)組防治放射性直腸炎的療效優(yōu)于陽性對(duì)照組。復(fù)方灌腸1、2號(hào)組之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但總體上各期評(píng)分復(fù)方灌腸2號(hào)組均低于復(fù)方灌腸1號(hào)組，提示復(fù)方灌腸2號(hào)

9、組療效可能更好。5）大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α水平陽性對(duì)照組、復(fù)方灌腸1號(hào)組、復(fù)方灌腸2號(hào)組與正常對(duì)照組、陰性對(duì)照組比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，提示局部照射后引起直腸炎，致大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α增加，藥物保留灌腸防治放射性直腸炎其機(jī)制可能與降低大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α的表達(dá)有關(guān)。復(fù)方灌腸1、2號(hào)組與陽性對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，提示復(fù)方灌腸1、2號(hào)組降低大鼠血清IL-6、

10、IL-8、TNF-α水平的效果優(yōu)于陽性對(duì)照組。復(fù)方灌腸1、2號(hào)組之間比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但總體上復(fù)方灌腸2號(hào)組大鼠血清IL-6、IL-8、TNF-α水平均低于復(fù)方灌腸1號(hào)組，提示復(fù)方灌腸2號(hào)組的效果可能更好。
　　結(jié)論:1、采用6MV-X射線局部單次大劑量(25Gy)照射的方法可成功建立放射性直腸炎模型。2、消痔靈、慶大霉素、谷氨酰胺、美沙拉嗪保留灌腸可提高治療急性放射性直腸炎的療效，減輕急性放射性直腸炎的炎癥、損傷、分級(jí)程度。3