三紫創(chuàng)愈海綿敷料的藥效學(xué)及質(zhì)量評價研究.pdf

1、由于人口老齡化加劇，交通運(yùn)輸業(yè)迅速發(fā)展，車禍等創(chuàng)傷事故發(fā)生率不斷增加，使得皮膚傷口這一問題越來越成為世界范圍內(nèi)非常嚴(yán)重的健康問題與負(fù)擔(dān)。近年來，國內(nèi)外在傷口愈合方面也提出了很多新的治療理論、方法和技術(shù)。1974年誕生了全球第一塊密閉性敷料安舒妥，提出濕性愈合的理論，并逐漸被廣泛接受。近50年來，國內(nèi)大量關(guān)于創(chuàng)面的基礎(chǔ)研究和臨床治療證實了濕潤環(huán)境有利于傷口的愈合，新型保濕敷料也不斷進(jìn)入醫(yī)療市場。但新型敷料存在功能單一、缺乏復(fù)合治療功能、制

2、備工藝復(fù)雜、價格昂貴、市場普及慢等缺點(diǎn)，且國內(nèi)市場上的新型敷料主要來自歐美行業(yè)巨頭，本土企業(yè)的產(chǎn)品很少。中藥敷料在治療傷口修復(fù)方面獨(dú)具特色，能主動促進(jìn)創(chuàng)面愈合，防止瘢痕增生，適合于各類急慢性傷口的治療護(hù)理，且來源簡單、安全、副作用小，費(fèi)用不高，能提高傷口護(hù)理水平，降低醫(yī)療服務(wù)成本，提高醫(yī)院工作效率。然而，中藥敷料也存在不能維持密閉、微濕潤的環(huán)境、使用不便等不足，其安全性問題也一直備受關(guān)注。
　　醫(yī)用敷料質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到患者的生

3、命安全，發(fā)達(dá)國家從20世紀(jì)60年代就開始對醫(yī)用敷料進(jìn)行安全性監(jiān)測。1976年，美國食品藥物管理局(FDA)開始管理醫(yī)用敷料，并實行售前審批制度，建立了一系列生物和質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn)。我國從70年代后期開始研究醫(yī)用敷料的生物學(xué)評價，中國醫(yī)療器械注冊的相關(guān)規(guī)定要求醫(yī)用敷料正式進(jìn)入市場前，在完成加工性能、外形設(shè)計等程序后，必須對其進(jìn)行物理和化學(xué)性能評價，生物學(xué)評價、制定產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)等，但是與發(fā)達(dá)國家相比還是有一定差距。如由于中藥敷料成分復(fù)雜，且制劑

4、形式多樣，國家尚未建立統(tǒng)一化的中藥敷料評價標(biāo)準(zhǔn)，制約著其產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。
　　因此，中藥敷料的研究存在一些不足，研發(fā)體系存在著缺陷，需要進(jìn)一步完善。本課題組在總結(jié)中草藥和民間廣為流傳使用的傷科驗方基礎(chǔ)上，依據(jù)中藥組方原則，選取功效不同的中草藥創(chuàng)制出傷科驗方“三七復(fù)方”。全驗方由三七、紫珠草、白芨、兒茶、雞矢藤、兩面針、虎杖等9味中草藥組成，具有良好的止血、抗菌、消腫、鎮(zhèn)痛等作用，但原劑型存在使用不便、容易污染傷口等不足。本課題組已對該

5、傷科驗方進(jìn)行改革，將該中藥傷科驗方的特色與新型保濕敷料的優(yōu)勢結(jié)合起來，研制開發(fā)出一種能夠提供一個濕性愈合的環(huán)境，快速吸收滲出液，促進(jìn)肉芽生長，減少感染，主動促進(jìn)創(chuàng)面愈合的中藥復(fù)合海綿敷料，即三紫創(chuàng)愈海綿敷料，適用于各類機(jī)械性或創(chuàng)傷性傷口、慢性感染傷口、糖尿病足潰瘍等急慢性傷口。然而，其安全性和藥效有待證實，質(zhì)量有待評價。為此，我們對三紫創(chuàng)愈海綿敷料進(jìn)行藥效學(xué)和質(zhì)量分析研究，確保海綿敷料安全有效、穩(wěn)定可控，為醫(yī)用敷料的注冊審批提供重要科研

6、資料，為進(jìn)一步擴(kuò)大生產(chǎn)提供科學(xué)的依據(jù)。
　　目的:
　　1.驗證三紫創(chuàng)愈海綿敷料對大鼠創(chuàng)面修復(fù)的影響，探討其治療機(jī)理。
　　2.評價三紫創(chuàng)愈海綿敷料的物理性能。
　　3.鑒別三紫創(chuàng)愈海綿敷料中藥材三七、虎杖。
　　方法:
　　1.三紫創(chuàng)愈海綿敷料的藥效學(xué)研究
　　本研究采用大鼠背部小面積皮膚切除傷模型，將大鼠隨機(jī)分為3組，陰性對照組10只，陽性對照組10只，實驗組10只。大鼠取俯臥位，脫去大鼠背

7、部毛發(fā)，用3％的戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，碘伏及70％乙醇常規(guī)消毒皮膚后，用利刀于大鼠背部左右對稱制作2個直徑為2cm的圓形全層缺損創(chuàng)面，醋酸洗必泰溶液充分清洗消毒創(chuàng)面。實驗組用自制的三紫創(chuàng)愈海綿敷料覆蓋創(chuàng)面，陽性對照組用空白海綿基質(zhì)覆蓋創(chuàng)面，陰性對照組用凡士林紗布覆蓋創(chuàng)面，三組外層均用無菌紗布敷料包扎。前三天每日換藥一次，三天后隔一天換藥，一周后隔兩天換藥。每次換藥時，觀察三組大鼠性情和行為等生活情況以及創(chuàng)面大體情況，包括精神狀況、攝食

8、及飲水情況、活動情況、創(chuàng)面滲出、出血、感染跡象、肉芽組織生長情況，并選定創(chuàng)面面積、炎癥積分、病理學(xué)情況作為修復(fù)指標(biāo)。治療后第3d、7d、14d，數(shù)碼相機(jī)拍照，利用Image J軟件測定刻度尺像素比例，測出創(chuàng)面面積，計算創(chuàng)面愈合率;治療后第3d、7d測創(chuàng)面炎癥積分，計算炎癥積分值并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析;于治療后第3d、7d、14d隨機(jī)抽取6只大鼠（每組2只）過量麻醉處死，立即切取創(chuàng)面皮膚，4％的多聚甲酵固定，用H.E染色，觀察炎細(xì)胞浸潤及壞死、

9、纖維細(xì)胞及毛細(xì)血管增生、膠原纖維等情況，進(jìn)行形態(tài)學(xué)描述。
　　2.三紫創(chuàng)愈海綿敷料的質(zhì)量研究
　　本研究應(yīng)用文獻(xiàn)回顧的方法，參照《中國藥典》2010版的相關(guān)要求及中國醫(yī)療器械注冊的相關(guān)規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，咨詢中藥制劑學(xué)、護(hù)理學(xué)的臨床及教學(xué)一線專家，采用薄層色譜法對三紫創(chuàng)愈海綿敷料進(jìn)行定性鑒別，鑒別海綿敷料中人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1、虎杖苷。將對照品溶液、供試品溶液、陰性溶液點(diǎn)于同一薄層板上，在展開容器內(nèi)用展開劑展開，使試樣溶液所

10、含成分分離，所得色譜圖進(jìn)行對比，進(jìn)行制劑的鑒別。同時選取透氣率、吸水率、保濕性、抗撕強(qiáng)度、重量差異、耐熱性、耐寒性等7個指標(biāo)作為海綿敷料的評價指標(biāo)。為了驗證工藝條件合理性，進(jìn)行了三批三紫創(chuàng)愈海綿敷料的研究。
　　結(jié)果:
　　1.大鼠飲食和活動情況
　　麻醉清醒后，各組大鼠均精神不佳，無任何主動活動及飲食;治療后第3d，實驗組和陽性對照組大鼠精神狀態(tài)、主動活動、飲食均接近正常，陰性對照組有少量活動及飲食，精神狀態(tài)好轉(zhuǎn);治

11、療后第7d、14d組各大鼠精神狀態(tài)、主動活動、飲食均正常，組間無明顯差別。各組均未見實驗性的大鼠死亡。
　　2.大鼠傷口愈合情況
　　創(chuàng)面愈合率比較，治療后第3天，實驗組創(chuàng)面愈合率為(40.22±0.05)％，陽性對照組創(chuàng)面愈合率為(38.33±0.1)％，高于陰性對照組創(chuàng)面愈合率(22.02±0.03)％，比較有顯著性差異(P＜0.05);治療后第7天，實驗組創(chuàng)面愈合率為(71.32±0.08)％，高于陽性對照組創(chuàng)面愈合率

12、(60.66±0.09)％和陰性對照組創(chuàng)面愈合率(50.01±0.10)％，比較有顯著性差異(P＜0.05);治療后第14天，實驗組創(chuàng)面愈合率為(90.44±0.07)％，高于陽性對照組創(chuàng)面愈合率(81.03±0.04)％和陰性對照組創(chuàng)面愈合率(71.65±0.10)％，比較有顯著性差異（P＜0.05）。三紫創(chuàng)愈海綿敷料能縮小創(chuàng)面面積，縮短創(chuàng)面的愈合時間，提高創(chuàng)面愈合率。
　　病理學(xué)觀察，與對照組相比，治療后第3d，實驗組較早出現(xiàn)

13、毛細(xì)血管，成纖維細(xì)胞開始增殖。治療后第7d，實驗照組創(chuàng)面纖維增生明顯，膠原纖維明顯多于對照組。治療后第14d，與對照組相比實驗組膠原纖維增生明顯，與術(shù)后第7d相比沒有明顯改變，傷口未見異物組織，沒有組織破壞和壞死現(xiàn)象。三紫創(chuàng)愈海綿敷料能促進(jìn)毛細(xì)血管和膠原纖維的生長。
　　炎癥積分比較，治療后第3天，實驗組創(chuàng)面炎癥積分為(3.20±0.42)分，低于陽性對照組創(chuàng)面炎癥積分(4.18±0.60)分和陰性對照組創(chuàng)面炎癥積分(5.67±0

14、.50)分，比較有顯著性差異(P＜0.05);治療后第7天，實驗組創(chuàng)面炎癥積分為(1.70±0.48)分，低于陽性對照組創(chuàng)面炎癥積分(2.55±0.52)分和陰性對照組創(chuàng)面炎癥積分(3.89±0.33)分，比較有顯著性差異（P＜0.05）。三紫創(chuàng)愈海綿敷料能減少創(chuàng)面滲液的過多分泌。
　　3.三紫創(chuàng)愈海綿敷料的質(zhì)量評價
　　實驗結(jié)果顯示三紫創(chuàng)愈海綿敷料的平均透氣率為80.86％，故本品透氣率暫定為不低于78％;平均保濕率為38

15、.11％，保濕率暫定為不低于35％;平均吸水率為11.15倍，吸水率暫定為不低于10倍;平均抗撕強(qiáng)度為131.59g/cm3，抗撕強(qiáng)度標(biāo)準(zhǔn)暫定為不小于130g/cm3;最大片重差異為3.5％，最小片重差異為3.4％，重量差異限度在平均重量的±5％以內(nèi)，符合藥典評價標(biāo)準(zhǔn)。于冰箱中貯存后，敷料未見明顯分層現(xiàn)象;放置烘箱后，敷料表面無滲油現(xiàn)象，有光澤。三紫創(chuàng)愈海綿敷料具有良好的透氣率、吸水率和保濕性，耐熱、耐寒、賦形性良好，抗撕強(qiáng)度高，重量差

16、異差別小。薄層色譜鑒別三紫創(chuàng)愈海綿敷料中三七及虎杖的分離度好，樣品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上有相同顏色的斑點(diǎn)，且陰性無干擾。
　　結(jié)論:
　　1.通過對三紫創(chuàng)愈海綿敷料主要藥效學(xué)的研究表明，三紫創(chuàng)愈海綿敷料具有快速止血、抗炎抑菌、活血化瘀等作用，能吸收傷口過多的滲出物，防止感染，為創(chuàng)面愈合創(chuàng)造良好的微環(huán)境，促進(jìn)創(chuàng)面血管新生，促進(jìn)肉芽組織生長，加速創(chuàng)面的愈合，并能減少瘢痕的產(chǎn)生，減少后遺癥，降低死亡率。三紫創(chuàng)愈海綿敷料