雨生紅球藻的紫外誘變、抗銨品系篩選及培養(yǎng)條件優(yōu)化.pdf

1、蝦青素是一種具有強(qiáng)抗氧化能力的色素，被廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、化妝品及飼料添加劑等領(lǐng)域。雨生紅球藻（Haematococcus pluvialis）在不利條件下能夠積累大量蝦青素，是目前已知的自然界中天然蝦青素含量最高的生物，是獲取天然蝦青素的理想來(lái)源，選取適合大規(guī)模培養(yǎng)的雨生紅球藻藻株成為近年來(lái)該領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)之一。
　　 在培養(yǎng)過(guò)程中主要存在以下問(wèn)題：首先，雨生紅球藻的生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，生長(zhǎng)緩慢；其次，培養(yǎng)過(guò)程中易受到敵害生物的污染。

2、r>　　 本實(shí)驗(yàn)以野生型雨生紅球藻為出發(fā)株，經(jīng)過(guò)單細(xì)胞分離篩選出一株生長(zhǎng)速率快的藻株，使用紫外線(xiàn)處理篩選出的雨生紅球藻藻株。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定適合的誘變時(shí)間為5min，以400㎎/L的NH4HCO3作為篩選條件，在此條件下，輪蟲(chóng)等敵害生物無(wú)法生存，經(jīng)篩選得到可以在含有NH4HCO3的濃度為400㎎/L的培養(yǎng)基中正常生長(zhǎng)并且生長(zhǎng)速率快的誘變株。
　　 本實(shí)驗(yàn)探討了雨生紅球藻野生型及抗銨品系誘變株誘導(dǎo)積累蝦青素的條件。通過(guò)研究光照、

3、NaNO3濃度、NaCl濃度及溫度對(duì)兩種品系雨生紅球藻蝦青素積累誘導(dǎo)作用的單因子實(shí)驗(yàn)，得到適宜藻體積累蝦青素的光照、NaNO3濃度、NaCl濃度、溫度的范圍。根據(jù)單因子實(shí)驗(yàn)進(jìn)行四因素三水平的正交實(shí)驗(yàn)，得到兩種品系適宜蝦青素積累的條件組合均為：光照200μmol·m-2·s-1，NaNO30mol㎎/L，NaCl2g/L，溫度27℃。
　　 本實(shí)驗(yàn)研究了培養(yǎng)基組成及培養(yǎng)條件對(duì)雨生紅球藻野生型及抗銨品系誘變株生長(zhǎng)的影響。通過(guò)研究培養(yǎng)

4、基中NaNO3、KH2PO4、FeCl3·6H2O的濃度及溫度、光照、pH的大小對(duì)兩種品系雨生紅球藻生長(zhǎng)影響的單因子實(shí)驗(yàn)，得到適宜藻細(xì)胞生長(zhǎng)的各因子范圍，然后分別進(jìn)行三因子三水平的正交實(shí)驗(yàn)，得到的兩品系優(yōu)化后的培養(yǎng)基有所差異，野生型雨生紅球藻生長(zhǎng)的最適條件為NaNO3500㎎/L，KH2PO4100㎎/L，F(xiàn)eCl3·6H2O1.0㎎/L，溫度18℃，光照強(qiáng)度1001μmol·m-2`·S-1，pH8；誘變株生長(zhǎng)的最適條件為：NaNO3