擬南芥ISWI染色質(zhì)重塑復(fù)合體成員RINGLET的功能研究.pdf

1、ATP依賴型染色質(zhì)重塑復(fù)合體能夠通過水解ATP獲得能量，通過多種方式如移動，組裝，替換，剔除核小體來改變?nèi)旧|(zhì)的結(jié)構(gòu)，從而在染色質(zhì)水平改變基因的表達狀況。在真核生物中，The Imitation Switch(ISWI)類型的ATP依賴型染色質(zhì)重塑因子序列保守，在已報道的不同物種中具有不同的生物學(xué)的功能。在擬南芥中已經(jīng)報道，ISWI染色質(zhì)重塑復(fù)合體的重要成員CHROMATIN-REMODELING PROTEIN11(CHR11)通過R

2、NAi喪失功能后，植株整體以及器官明顯變小，細(xì)胞不能正常擴展，并且影響了大孢子胚囊的發(fā)育使其停滯在早期。為了進一步研究擬南芥ISWI染色質(zhì)重塑復(fù)合體的功能，我們通過反向遺傳學(xué)篩選到了其復(fù)合體中的其他成員：RINGLET1(RLT1)及其同源蛋白RLT2。我們通過各種生化實驗證明RLT1/2都能與CHR11結(jié)合。rlt1和rlt2單突變無明顯發(fā)育缺陷，rlt1 rlt2雙突變卻展現(xiàn)出非常明顯不正常的缺陷表型：植株明顯變小，早花，蓮座葉出現(xiàn)

3、卷曲等。通過基因芯片以及RT-PCR的分析，我們發(fā)現(xiàn)在rlt1 rlt2雙突變蓮座片中SEPALLATA1(SEP1)，，SEP3，F(xiàn)RUITFULL(FUL)等開花相關(guān)基因表達量比野生型蓮座葉明顯上升。而SEP1，SEP3，F(xiàn)UL等基因蓮座葉中也被另一條表觀沉默途徑：多梳(Polycomb)復(fù)合體通過H3K27me3修飾而抑制。我們通過一系列實驗發(fā)現(xiàn)擬南芥RLT-ISWI復(fù)合體能夠協(xié)同Polycomb途徑對蓮座葉中SEP1，SEP3等