多價(jià)大腸桿菌噬菌體裂解性能分析及基因組注釋.pdf

1、多價(jià)噬菌體具有廣泛的宿主譜，在細(xì)菌病的治療方面有著廣闊的應(yīng)用前景。本研究以一株禽源致病性大腸桿菌的多價(jià)噬菌體Bp7為主要研究對(duì)象，進(jìn)行了噬菌體形態(tài)、裂解譜、生活周期、基因組學(xué)及其與其它噬菌體的抗原差異性分析的一系列研究。
　　 以40株大腸桿菌為宿主菌，采用雙層瓊脂平板法測(cè)定噬菌體Bp7的效價(jià)及裂解譜，并應(yīng)用透射電鏡觀察分析其病毒粒子形態(tài)以及其侵染并裂解大腸桿菌的過程。結(jié)果顯示:Bp7寬噬率為35％。病毒粒子的頭部外廓呈六邊形，

2、平均直徑約73nm，尾長(zhǎng)約106nm，有尾鞘;噬菌體Bp7侵染大腸桿菌后30min時(shí)處于隱蔽期，45min時(shí)處于成熟階段，60min時(shí)已經(jīng)進(jìn)入釋放期，一個(gè)溶菌周期大約為60min。
　　 選擇6株不同裂解譜的大腸桿菌噬菌體，進(jìn)行抗體與噬菌體的交叉抑制試驗(yàn)，并經(jīng)SDS-PAGE電泳分析噬菌體間的抗原差異。結(jié)果:原裂解譜相同的噬菌體，主蛋白區(qū)域分布相同;原裂解譜部分相同的噬菌體，蛋白條帶分布情況相似。具有相同或部分相同裂解譜的噬菌體

3、，在吸附同一株大腸桿菌時(shí)所結(jié)合的位點(diǎn)并不一定相同;在這6株噬菌體的表面存在著部分相同的表面抗原，同時(shí)存在著各自特異的表面抗原。
　　 采用鳥槍法對(duì)噬菌體Bp7基因組進(jìn)行序列測(cè)定，并進(jìn)行注釋。結(jié)果:噬菌體Bp7與腸桿菌科噬菌體JS98和JS10同源性達(dá)90％以上;已發(fā)現(xiàn)243個(gè)ORFs，預(yù)測(cè)到68個(gè)可能基因，包括頭部、頸部、衣領(lǐng)、尾鞘、尾管、基底板、尾絲基因、DNA聚合酶、翻譯抑制蛋白、DNA結(jié)合蛋白、重組蛋白、引發(fā)酶/解旋酶、末