基于移動(dòng)反應(yīng)界面的基礎(chǔ)研究及藥物應(yīng)用.pdf

1、在毛細(xì)管電泳實(shí)現(xiàn)聚焦，發(fā)揮富集功能的方面，移動(dòng)反應(yīng)界面（MRB）理論近年來(lái)備受矚目，得到了迅速的發(fā)展。本文在MRB理論的基礎(chǔ)上，首先引入了毛細(xì)管電泳技術(shù)的基本原理和概念，介紹了在MRB理論基礎(chǔ)上建立的移動(dòng)親和反應(yīng)界面（MAIB）理論，并將該理論在多種氨基酸的混合樣品以及復(fù)雜生物樣品尿樣中應(yīng)用得到驗(yàn)證，介紹了生物堿類物質(zhì)槐定堿利用MRB理論進(jìn)行富集檢測(cè)并應(yīng)用于生物樣品血樣的檢測(cè)成果。本研究分為兩個(gè)部分： 第一部分，在移動(dòng)親和反應(yīng)界

2、面的新型理論建立中，先介紹了親和毛細(xì)管電泳的相關(guān)發(fā)展，并對(duì)比其他科研工作的研究方法，提出了該理論方法不同的原理和非常優(yōu)越的特點(diǎn)。然后介紹了在這一理論上逐步探索的各個(gè)重要實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化，得到了實(shí)現(xiàn)聚焦組氨酸的最佳條件：在208nm的紫外檢測(cè)波長(zhǎng)下，53cm毛細(xì)管總長(zhǎng)（44cm有效長(zhǎng)度），12kv的電壓，在50mM pH6.0的含有1mM NaCl的Na2HPO4-NaH2PO4 緩沖液體系中，陽(yáng)極小槽中為2mM NiCl2時(shí)，可以在毛細(xì)管

3、電泳中實(shí)現(xiàn)很好的聚焦組氨酸。其中，His的定量限為120 ng/ml，檢測(cè)限可以達(dá)到36 ng/ml，聚焦倍數(shù)高達(dá)48倍，在1μM-70μM His的線性范圍，相關(guān)系數(shù)可達(dá)到99.0％。此結(jié)論應(yīng)用于20種基本氨基酸中選擇性聚焦His的實(shí)驗(yàn)，得到了很好的結(jié)果；應(yīng)用于尿樣檢測(cè)時(shí)，尿樣不需要進(jìn)行復(fù)雜的前處理，僅稀釋和調(diào)節(jié)pH值即可以進(jìn)行，初步說(shuō)明了該方法可以成功的實(shí)現(xiàn)對(duì)His陽(yáng)性樣本尿液的His檢測(cè)。 第二部分，在基本的MRB原理介紹

4、后，對(duì)富集實(shí)驗(yàn)體系的主要因素進(jìn)行了條件優(yōu)化，得到最佳的實(shí)驗(yàn)環(huán)境：pH 2.6 40mM甲酸緩沖液的分離相，相同條件的富集相，以及pH 10.8 100mM甲酸鈉-氨水體系的樣品相，15 kv的電壓，14mBa的壓力進(jìn)樣2min；然后在相關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，運(yùn)用了恰當(dāng)?shù)难獦忧疤幚矸椒?，即用氯仿將槐定堿從大鼠血樣中萃取出來(lái)，實(shí)現(xiàn)了槐定堿在血樣中的檢測(cè)，線性測(cè)試及日間差，日內(nèi)差的測(cè)試。其中，檢測(cè)限為0.492 ug/ml，定量限為1.640 ug