利用OsPHF1培育磷高效吸收轉(zhuǎn)基因水稻新品種的研究.pdf

1、植物磷轉(zhuǎn)運體轉(zhuǎn)錄后調(diào)控(從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)到細胞質(zhì)膜(PM))受到磷酸鹽轉(zhuǎn)運體運輸協(xié)助因子PHF1蛋白的調(diào)控。水稻OsPHF1基因也已被克隆。前期研究表明，超表達OsPHF1可以增強水稻磷吸收能力。本研究利用農(nóng)桿菌介導的轉(zhuǎn)基因方法，通過構(gòu)建雙價T-DNA載體將超表達OsPHF1導入到秈稻超級雜交稻恢復系9311。通過對轉(zhuǎn)基因材料的篩選、分子生物學鑒定，生理測定與田間試驗，得到以下結(jié)果:
　　 1、采用PCR、RT-PCR、Sout

2、hernBlot等分子生物學方法對T0代轉(zhuǎn)基因材料進行鑒定，并用兩個OsPHF1超表達轉(zhuǎn)基因獨立株系進行生理與田間條件分析。
　　 2、在正常供磷溶液培養(yǎng)條件下，對T1代OsPHF1基因超表達株系葉片及根有效磷含量的測定和33P吸收動力學分析。結(jié)果表明，對比野生型親本，OsPHF1超表達株系有效磷含量及磷吸收能力顯著提高。
　　 3、T2代兩個OsPHF1基因超表達株系在海南實驗基地田間試驗表明，在不施磷肥條件下，轉(zhuǎn)基因

3、植株的有效穗數(shù)、生物量、產(chǎn)量較野生型均有顯著提高。對供試轉(zhuǎn)基因材料總磷含量的測定表明，兩個OsPHF1基因超表達株系總磷含量較野生型均顯著升高。
　　 4、T3代兩個OsPHF1基因超表達株系在浙江長興實驗基地田間試驗表明，低磷（不施磷肥）和中磷（施磷肥:225公斤過磷酸鈣/公頃）條件下，兩個OsPHF1基因超表達株系的有效穗、生物量和產(chǎn)量較野生型均有顯著提高，正常供磷條件下（正常施磷肥:450公斤過磷酸鈣/公頃）差異不顯著。低