亞低溫對急性肺損傷大鼠TLR2蛋白表達及下游促炎因子的影響.pdf

1、目的:探討亞低溫對急性肺損傷保護作用的可能機制之一，是通過下調(diào)TLR2表達，并進一步減少TLR2/MYD88信號通路下游促炎因子的分泌。
　　方法:90只雄性的SD大鼠，隨機分為4個組。亞低溫組、控溫組及非控溫組氣管內(nèi)滴入10mg/ml的脂多糖(LPS)5mg/Kg制備急性肺損傷動物模型，對照組氣管內(nèi)滴入等量的生理鹽水。滴入脂多糖1h后，亞低溫組及控溫組分別將直腸溫度維持在32-34℃，36-37℃。分別于滴入LPS或生理鹽水后2

2、h、7h、13h后放血處死大鼠。于滴入LPS或生理鹽水前、滴入LPS或生理鹽水后1h及處死大鼠之前，抽取動脈血測定動脈血氣分析。取右肺組織用10％的多聚甲醛固定，HE染色，光鏡下觀察肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，進行肺損傷病理評分。通過蛋白質(zhì)印跡法(western blot)檢測大鼠肺組織的TLR2蛋白的表達，采用逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(RT-PCR)檢測大鼠肺組織的髓樣分化因子(MyD88) mRNA、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）mRNA、誘導型一

3、氧化氮合酶(iNOS)mRNA的轉(zhuǎn)錄。
　　結(jié)果:LPS刺激下，氧分壓明顯下降;肺損傷病理評分升高;TLR2蛋白表達及Myd88 mRNA、TNF-α mRNA、iNOS mRNA轉(zhuǎn)錄水平逐步上升。1h、6h亞低溫組氧分壓高于控溫組及非控溫組(1h:84.52±8.11比72.59±8.00，66.39±4.19，均P＜0.05;6h:73.44±20.62比59.71±2.87,55.28±11.99，均P＜0.05),12h亞

4、低溫組氧分壓與控溫組及非控溫組沒有差異(50.65±3.74比49.02±6.01，46.25±3.73，均P＞0.05)。同一時間點，亞低溫組肺組織病理評分低于控溫組及非控溫組(1h:6.04±0.74比7.95±0.65，8.17±0.59，均P＜0.001;6h:9.09±0.80比13.13±1.02，13.00±0.98，均P＜0.001;12h:10.79±1.42比13.42±0.68,13.38±1.08,均P＜0.05

5、); TLR2蛋白表達低于控溫組及非控溫組(1h:0.19±0.03比0.23±0.04,0.24±0.05,均P＜0.001;6h:0.30±0.05,比0.41±0.10,0.45±0.08,均P＜0.001;12h:0.70±0.09比0.94±0.08,0.99±0.10,均P＜0.001);MyD88 mRNA、 TNF-a mRNA和iNOS mRNA的轉(zhuǎn)錄水平(2-ΔΔCT)低于控溫組及非控溫組(MyD88 mRNA1h:

6、2.25±0.41比3.04±0.30,3.14±0.35,均P＜0.001;6h:5.67±0.55比7.01±0.76,7.20±0.55,均P＜0.001;12h:7.14±0.60比8.87±0.54,9.17±0.73,均P＜0.001;TNF-a mRNA1h:2.52±0.21比2.98±0.23,3.04±0.30,均P＜0.001;6h:4.60±0.31比5.52±0.33,5.62±0.42,均P＜0.001;12

7、h:6.95±0.77比8.58±0.50,8.88±0.51,均P＜0.001;iNOS mRNA1h:1.99±0.16比2.38±0.23,2.46±0.16,均P＜0.001;6h:5.17±0.46比6.06±0.40,6.21±0.45,均P＜0.001;12h:6.85±0.47比7.68±0.53,7.88±0.56,均P＜0.001)。
　　結(jié)論:亞低溫能降低LPS誘導的急性肺損傷大鼠的TLR2蛋白表達，并進一步