耐丁草胺菌株BUT-6T的篩選及其多相分類研究.pdf

1、在世界范圍內(nèi)，氯代乙酰胺類除草劑受到廣泛應(yīng)用，而其中丁草胺（Butachlor）是亞洲范圍內(nèi)應(yīng)用最廣的苯乙酰胺除草劑，現(xiàn)已成為我國(guó)廣泛使用的除草劑之一。目前丁草胺的用量不斷增加，存在不合理地使用現(xiàn)象，伴隨著其溶淋滲透作用，其對(duì)各種土壤、水體的生態(tài)副作用將日益顯現(xiàn)。本研究從長(zhǎng)期受丁草胺作用的污泥中分離到一株對(duì)丁草胺有很強(qiáng)耐受能力的細(xì)菌命名為BUT-6T。
　　本文全面系統(tǒng)地研究該菌株的各種生理、生化、遺傳等特性。研究發(fā)現(xiàn)，在基礎(chǔ)鹽培

2、養(yǎng)基中加入1250mg· L-1丁草胺，菌株BUT-6T可仍然表現(xiàn)出有一定生長(zhǎng)。菌株BUT-6T的單細(xì)胞呈棒狀大小為0.5-0.6×3.5-4.0μm，革蘭氏染色顯陰性，無(wú)運(yùn)動(dòng)性鞭毛，不產(chǎn)生芽孢。在R2A培養(yǎng)基上于30℃培養(yǎng)3d后，菌落呈現(xiàn)黃色，表面凸起，近圓形，邊緣有透光性。BUT-6T生長(zhǎng)需氧，當(dāng)環(huán)境條件為30℃，1.0％NaCl，pH7.0時(shí)生長(zhǎng)狀況最佳。菌株BUT-6T脂肪酸的主要成分為iso-C15∶0，iso-C17∶1ω9

3、c，和iso-C17∶0(＞10％);主要極性脂種類有磷脂酰甲基乙醇胺、磷脂酰甘油、雙磷脂酰甘油、一個(gè)未鑒定的氨磷脂還有3種未知的磷酸脂類;最主要的呼吸醌是泛醌，即Q-8。BUT-6T的DNA G+C mol％含量為71.7 mol％;與BUT-6T的16S rRNA基因序列相似度最高的菌株是Tahibacter aquaticus PYM5-11T(98.6％);BUT-6T與參考菌株Tahibacter aquaticus PYM5

4、-11T的DNA-DNA雜交同源性為47.1±0.71％，遠(yuǎn)低于新種鑒定閾值同源性70％。
　　菌株BUT-6T的過(guò)氧化氫酶、氧化酶、酪蛋白水解試驗(yàn)呈陰性;堿性磷酸酶、酯酶(C4、C8)、類酯酶(C14)、亮氨酸芳胺酶、纈氨酸芳胺酶、胱氨酸芳胺酶、胰蛋白酶反應(yīng)呈陽(yáng)性;半乳糖苷酶等反應(yīng)呈陰性;七葉苷、明膠、尿素、吐溫-80水解呈陽(yáng)性;不產(chǎn)H2S和吲哚，也不能還原硝酸鹽。BUT-6T可以利用N-乙酰葡糖胺、癸酸、檸檬酸鹽、苯乙酸鹽、5