嗜熱微生物菌株多相分類學(xué)研究及菌株資源批量化篩選方法的建立.pdf

1、利用純培養(yǎng)方法，對位于我國新疆吉木薩爾縣的古海溫泉進(jìn)行嗜熱細(xì)菌的分離和純化，共分離得到9株細(xì)菌。基于16S rRNA基因序列分析和比對結(jié)果表明，其中3株菌屬于短桿菌屬Brevibacterium，且都與細(xì)菌Brevibacterium halotolerans的16S rRNA序列相似度達(dá)到100％。另3株菌的16S rRNA序列一致性為100％，選取其中一株細(xì)菌GU51T作為研究對象，通過EzTaxon-e網(wǎng)站的在線比對工具進(jìn)行比對，

2、其與細(xì)菌Thermovum composti的相似度最高且只為92.5％。剩下3株菌的16S rRNA序列一致性也為100％，選取其中一株細(xì)菌GU4T作為研究對象，通過在線比對，其與細(xì)菌Chelativorans multitrophicus的相似度最高且只為96.8％。本論文對菌株GU4T作了部分多相分類學(xué)研究，對菌株GU51T進(jìn)行了全部的多相分類學(xué)研究。
　　對分離于四川省普格縣普格溫泉中的疑似新種3nP4T進(jìn)行了多相分類學(xué)研

3、究。菌株3nP4T為革蘭氏陽性嚴(yán)格好氧菌，有鞭毛、產(chǎn)末端芽孢。最適生長溫度為57-60℃，生長pH范圍為pH7.0-7.5，NaCl耐受范圍為0-0.5％(w/v)。菌株3nP4T的主要極性脂為雙磷脂酰甘油、磷脂酰甘油、磷脂酰乙醇胺和一個無法確定的磷脂。iso-C15∶0和iso-C17∶0是其主要脂肪酸。菌株3nP4T為低G+C革蘭氏陽性細(xì)菌Ⅺ類聚群成員，其基因組DNA G+C mol％為39.2±0.95 mol％。根據(jù)對其多相分類

4、學(xué)研究證實其為Anoxybacillus屬一個新的物種，將其命名為Anoxybacillus vitaminiphilus sp.nov.。
　　在對細(xì)菌進(jìn)行多相分類學(xué)研究的基礎(chǔ)上，為進(jìn)一步研究細(xì)菌在生產(chǎn)應(yīng)用等各個方面的功能，初步搭建出了菌株批量化篩選平臺。利用實驗室現(xiàn)有的菌種資源，通過菌株活化、轉(zhuǎn)接、96孔板批量凍干保藏、96孔板菌株復(fù)活驗證其活性比率等步驟，獲得96孔板批量凍干保藏菌株（470株菌，25個96孔板）。在其基礎(chǔ)上