版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:通過系統(tǒng)的研究人工制備雙層生物膜中卵磷脂、腦磷脂、膽固醇、鞘磷脂、神經(jīng)酰胺的相互作用,從分子動力學(xué)角度分析結(jié)構(gòu)形成的原因。研究分子具有的官能團在形成結(jié)構(gòu)中作用,從而為組裝生物膜的脂筏結(jié)構(gòu)奠定基礎(chǔ)。再通過體外模擬和體內(nèi)分離相結(jié)合的方法,從細胞中分離脂筏,對其結(jié)構(gòu)、組成成分、物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)進行研究,探索脂筏結(jié)構(gòu)和功能的生物學(xué)特性。 方法: 1.利用LB技術(shù)測試單分子層膜的平均分子面積和表面壓力等溫線,采用Y型提
2、膜方法保持一定的膜壓在新解離的云母片上制備脂雙層膜。 2.用原子力顯微鏡檢測不同脂成份形成的脂雙層膜結(jié)構(gòu)。 3.通過蔗糖密度梯度離心,用去垢劑處理質(zhì)膜樣品提取脂筏成份。 結(jié)果: 1.對于單元系統(tǒng),磷脂酰膽堿單層膜的等溫線都表現(xiàn)出明顯的相變點,而鞘磷脂、膽固醇沒有明顯的相變點。原子力顯微鏡觀察到磷脂酰膽堿分子結(jié)構(gòu)容易形成聚團的微區(qū)囊泡結(jié)構(gòu),鞘磷脂則易于形成結(jié)構(gòu)均一的雙層膜結(jié)構(gòu)。膽固醇易于聚團,形成片
3、層結(jié)構(gòu)。通過單元系統(tǒng)的實驗,熟悉掌握了制備人工雙層膜系統(tǒng),為下一步進行多元系統(tǒng)實驗奠定基礎(chǔ)。 2.對于二元系統(tǒng)系統(tǒng),等摩爾配比的鞘磷脂(SM)/磷脂酰膽堿(PC)、鞘磷脂(SM)/磷脂酰乙醇胺(PE)和鞘磷脂(SM)/膽固醇(Ch01)表現(xiàn)出不同的結(jié)構(gòu)特征。SM/PC能形成具有周期性的波紋結(jié)構(gòu),在較大的膜壓下能形成圓形的微區(qū)結(jié)構(gòu),飄浮在液態(tài)PC上。在膜壓最大時,雙層膜表現(xiàn)為穩(wěn)定地片層結(jié)構(gòu)。對于SM/PE組成的系統(tǒng),在較低膜壓下
4、,形成了邊界非常明顯的微區(qū)結(jié)構(gòu),微區(qū)內(nèi)部兩組份形成了聚集體結(jié)構(gòu)。在較大的膜壓情況下,形成大片層和緊密的聚集體結(jié)構(gòu)。而SM/Chol則在低膜壓下形成均一的結(jié)構(gòu),云母表面的覆蓋率在60%以上,均勻分布,結(jié)構(gòu)鮮明。當(dāng)在較高膜壓時能形成穩(wěn)定的具有許多孔洞的片層結(jié)構(gòu)。 3.對于三元系統(tǒng)系統(tǒng),主要研究了等摩爾配比的SM/Chol/PC、SM/Chol/PE和SM/Chol/:神經(jīng)酰胺(Ceramide)混合物的雙層膜結(jié)構(gòu)特性。同時研究了不
5、同比例的Chol在SM/PC中的分布。結(jié)果表明,SM/Chol/PC能在中間膜壓情況下形成圓形的結(jié)構(gòu)微區(qū),SM/Chol形成緊密的液態(tài)有序相,大小約為200nm。在膜壓較高的情況形成了多孔洞的片層結(jié)構(gòu)。對于SM/Chol/PE不能形成規(guī)則的微區(qū)結(jié)構(gòu),易于形成脂質(zhì)體小泡狀結(jié)構(gòu)。而SM/Chol/Ceramide在低膜壓下形成均勻的分散的多片層結(jié)構(gòu),在中間膜壓形成了更加緊密聚集的顆粒結(jié)構(gòu),顆粒表現(xiàn)為中間低邊緣高的結(jié)構(gòu)特性,這與提出的脂筏結(jié)構(gòu)
6、相似。當(dāng)在SM/PC中逐漸加入Chol時,實驗發(fā)現(xiàn),膽固醇和帶飽和脂肪酸鏈的磷脂發(fā)生相互作用形成微區(qū)結(jié)構(gòu),隨著膽固醇含量的增加,微區(qū)的面積逐漸增大,形成了穩(wěn)定的片層結(jié)構(gòu)。在三元系統(tǒng)的基礎(chǔ)上,對多元系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)進行了觀測,研究了不同比例的Ceramide在等摩爾SM/PC/Chol中的分布。隨著神經(jīng)酰胺比例的增加,先形成緊密的聚集態(tài)結(jié)構(gòu),然后逐漸演變成具有特定微區(qū)的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 4.提取細胞脂質(zhì)成分組裝和脂筏分離的結(jié)構(gòu)檢測。用蔗糖密
7、度梯度離心法從人血紅細胞中分離不溶于去垢劑Triton X-100的膜筏成份。原子力顯微鏡三維結(jié)構(gòu)測定表明單個脂筏以顆粒聚集體的形式存在,直徑約210nm的扁圓形中間凹陷結(jié)構(gòu)。分離干燥血影成份的LB膜結(jié)構(gòu)表現(xiàn)為穩(wěn)定的片層和聚集體共存結(jié)構(gòu),具有特定的結(jié)構(gòu)微區(qū)特性。實驗數(shù)據(jù)表明體外進行細胞膜脂筏結(jié)構(gòu)模擬組裝與在體分離方面具有相同的結(jié)構(gòu)。 結(jié)論:LB雙層膜的制備與多種因素有關(guān),如溫度、pH值、濃度等。不同分子所具有的官能團決定了結(jié)構(gòu)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 原子力顯微鏡
- 掃描隧道原子力顯微鏡
- 實驗七 原子力顯微鏡
- 并行原子力顯微鏡研制.pdf
- 計量型原子力顯微鏡的研究.pdf
- 原子力顯微鏡技術(shù)參數(shù)
- 高精密掃描隧道顯微鏡及原子力顯微鏡研制.pdf
- 采用顯微監(jiān)控的可選區(qū)原子力顯微鏡研究.pdf
- 原子力顯微鏡測頭系統(tǒng)的研究.pdf
- 超聲振動原子力顯微鏡成像研究.pdf
- 輕敲模式原子力顯微鏡的優(yōu)化研究.pdf
- 高速原子力顯微鏡的成像方法研究.pdf
- 原子力顯微鏡成像與納米操作控制的研究.pdf
- 基于原子力顯微鏡分析磁頭納米微結(jié)構(gòu)的研究.pdf
- 生物型原子力顯微鏡設(shè)備采購
- 原子力顯微鏡自動控制算法研究.pdf
- 原子力顯微鏡遠程細胞檢測技術(shù).pdf
- 布魯克原子力掃描探針顯微鏡
- 超聲原子力顯微鏡成像及分析.pdf
- 電化學(xué)原子力顯微鏡的研制.pdf
評論
0/150
提交評論