利用煙草表達(dá)人源性胰島素樣生長因子1（IGF-I）的研究.pdf

1、胰島素樣生長因子1(Insulin-Like Growth Factor I，IGF-I)氨基酸序列與胰島素高度同源，功能相似。IGF-I參與人體內(nèi)許多重要的生理活動(dòng)，在人類許多疾病臨床治療和生物細(xì)胞離體培養(yǎng)等方面都均有重要的應(yīng)用價(jià)值，需求較大。通過微生物和動(dòng)物細(xì)胞獲取的重組IGF-I，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足市場需求。為了尋找新的表達(dá)的途徑，獲取高效穩(wěn)定的人源性IGF-I表達(dá)體系，本研究利用根癌農(nóng)桿菌LAB4404介導(dǎo)，將含有35S啟動(dòng)子引導(dǎo)的人

2、源性IGF-I基因表達(dá)載體導(dǎo)入煙草。經(jīng)潮霉素(20mg/L)抗性篩選，GUS檢測和DNA PCR鑒定，獲得17棵轉(zhuǎn)基因植株。RT-PCR分析結(jié)果顯示，轉(zhuǎn)基因植株中IGF-I基因能夠正常轉(zhuǎn)錄。另外，本研究還構(gòu)建了由能夠在煙草中高效表達(dá)的花椰菜花葉病毒(CaMV)35S啟動(dòng)子引導(dǎo)的，含有植物偏愛性密碼子編碼的IGF-I基因(mIGF-I)的表達(dá)載體p1301-35S-mIGF-1-nos。試驗(yàn)結(jié)果表明，人源性IGF-I基因己成功導(dǎo)入煙草，并