脫水蛋白和CBF1轉錄因子對植物抗旱性和抗凍性作用的研究.pdf

1、浙江大學博士學位論文脫水蛋白和CBF1轉錄因子對植物抗旱性和抗凍性作用的研究姓名：邊紅武申請學位級別：博士專業(yè)：遺傳學指導教師：朱睦元20030801浙江大學博士學位逾丈以煙草為材料進行了轉CBFl基因研究，并對轉基因后代開展了形態(tài)變異觀察、抗凍性和抗旱性測定以及遺傳穩(wěn)定性分析。主要結果如下：1，將CBFl基因與CaMV35S啟動子融合構建植物表達載體pBll21CBFl，以農(nóng)桿菌介導的葉盤法轉化煙草，獲得轉化植株。經(jīng)C日F，基因的PC

2、R鑒定和轉基因后代(包括Tl、T2和T3代)的卡那霉素抗性分析，獲得2個單一位點插入的轉基因純系，證明了外源基因在轉基因煙草中的表達及遺傳。2采用電解質滲漏檢測和小苗凍害觀察進行轉基因后代的抗凍性檢測，結果顯示CBFl基因的表達有利于冰凍條件下細胞膜和葉綠體膜的穩(wěn)定性，從而使轉基因煙草的抗凍性增強。3，采用不同PEG處理濃度和處理對間對轉基因后代進行了抗旱性測定，發(fā)現(xiàn)可選用15％的PEG濃度處理48小時來測定小苗抗旱性。結果顯示轉基因煙

3、草的抗旱性比野生型煙草增強。4轉CBFl基因煙草出現(xiàn)明顯的表型變化，主要有植株矮化、花器官變異、葉片卷曲或細長和果實數(shù)減少等。分析原因可囂是與C／3F!轉錄因子所具有的AP2／EREBP結構域的功能有關。AP2基因是擬南芥花器官特征特異性基因，能在各輪花器宮及莖葉中表達，無組織特異性。推測CBFl基因的組成性表達，干擾了煙草原有的花器官和莖葉生長發(fā)育，導致轉基因植株的表型改變。關鍵詞：煙草鐵皮石斛類原球莖熱穩(wěn)定蛋白脫水蛋白CBFl轉錄因