載木犀草素靜電紡超細(xì)纖維對(duì)痛風(fēng)及其反復(fù)發(fā)作的治療研究.pdf

1、痛風(fēng)是一種嚴(yán)重危害全球人類健康的疾病，屬于關(guān)節(jié)炎癥的一種。痛風(fēng)自古以來就有之，通常發(fā)病于中老年人群，近年來發(fā)病率有逐漸增高的趨勢(shì)，尤其是沿海地區(qū)。當(dāng)患者由嘌呤紊亂而引起的血尿酸過多時(shí)，尿酸鈉鹽結(jié)晶會(huì)在關(guān)節(jié)處沉積，痛風(fēng)則會(huì)發(fā)作，發(fā)作時(shí)患者疼痛難忍，關(guān)節(jié)紅腫，行走吃力酸痛，通常需數(shù)周甚至數(shù)月才能自行恢復(fù)，但是遇到惡劣天氣或者不良生活習(xí)慣繼續(xù)時(shí)又會(huì)反復(fù)發(fā)作，給病患帶來極大的痛苦。臨床上治療痛風(fēng)往往是服用秋水仙堿，非甾體抗炎藥之類的西藥或者痛風(fēng)

2、靈之類的中藥，這些藥物雖然在短期內(nèi)有著不錯(cuò)的痛風(fēng)治療效果，但是其產(chǎn)生的副作用是不容忽視的。而且，藥物一旦停用，痛風(fēng)很容易反復(fù)發(fā)作，再次服用藥物又會(huì)導(dǎo)致惡性循環(huán)。因此如何非常有效的治療痛風(fēng)的反復(fù)發(fā)作是一大挑戰(zhàn)和難題。
　　基于以上背景，本研究工作的目的是尋找一種副作用小的可有效治療痛風(fēng)的藥物，同時(shí)開發(fā)出載有該種藥物的新型藥物制劑來克服痛風(fēng)反復(fù)發(fā)作。因此，本論文選用木犀草素作為有效治療痛風(fēng)炎癥的藥物，并利用靜電紡絲技術(shù)來制備出載木犀草

3、素的PCL/gelatin復(fù)合納米纖維藥物載體，當(dāng)提高PCL和明膠的質(zhì)量比例時(shí)，藥物的釋放速率可以得到延長，當(dāng)藥物載體為純的PCL時(shí)，該纖維可以達(dá)到接近3周左右的完全釋放時(shí)間，對(duì)痛風(fēng)的反復(fù)發(fā)作的治療有巨大的潛力。具體研究方法與結(jié)論如下，
　　首先，使用靜電紡絲方法分別制備載木犀草素的PCL/gelatin(5∶5)和PCL/gelatin(9∶1)復(fù)合納米纖維，以及載木犀草素的PCL微米纖維。在制備紡絲液時(shí)，滴加冰乙酸可以解決PC

4、L和gelatin的相分離，同時(shí)預(yù)先溶解木犀草素于微量DMF可以提高藥物的最終溶解度。
　　然后，建立痛風(fēng)的體外模型和體內(nèi)模型。在體外，使用脂多糖LPS與巨噬細(xì)胞RAW264.7共培養(yǎng)，RAW264.7會(huì)吞噬LPS而模擬炎癥的發(fā)生，是一種經(jīng)典的模擬關(guān)節(jié)炎癥的模型;此外，在體外使用黃嘌呤氧化酶(XOD)在37℃下與黃嘌呤反應(yīng)，295nm處的吸光度可以反映生成的尿酸的量，該反應(yīng)可以模擬痛風(fēng)形成過程的酶代謝過程。在體內(nèi)，將尿酸鈉鹽結(jié)晶(

5、MSU)注射入新西蘭大白兔的膝蓋關(guān)節(jié)腔內(nèi)可以構(gòu)建經(jīng)典的痛風(fēng)模型，一般認(rèn)為24h左右炎癥達(dá)到最明顯，滑膜組織通常作為研究的病灶;另外，在三個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)0天、7天和14天分別注射MSU到兔膝蓋關(guān)節(jié)腔可以模擬痛風(fēng)反復(fù)發(fā)作的過程。
　　最后，在體外體內(nèi)痛風(fēng)模型構(gòu)建成功后，使用載藥纖維膜考察其治療效果。在體外模型中，選用載木犀草素的PCL/gelatin(5∶5)的樣品考察。在LPS-RAW264.7體系中，取纖維在培養(yǎng)基中不同天數(shù)的釋放液

6、與細(xì)胞共培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)代謝活性明顯被抑制，而且炎癥因子明顯降低;在XOD反應(yīng)中，加入藥物釋放液后反應(yīng)速率明顯被抑制，與藥物濃度成正相關(guān)。在體內(nèi)短期痛風(fēng)模型中，同樣采用載木犀草素的PCL/gelatin(5∶5)考察治療效果，結(jié)果顯示:在皮下病灶部位附近植入載藥纖維后，炎癥明顯得以減輕，說明該復(fù)合載藥纖維有較好的短期治療效果。在痛風(fēng)反復(fù)發(fā)作模型中，考慮到周期較長，于是我們采用藥物釋放時(shí)間長的載木犀草素的PCL纖維治療，結(jié)果發(fā)現(xiàn):與空白組和注射