靜電紡纖維載藥系統(tǒng)動物體內(nèi)應用的療效研究.pdf

1、目的:
　　靜電紡纖維作為組織工程支架及藥物控釋載體已有廣泛研究。本論文通過靜電紡纖維內(nèi)復合碳酸氫鈉(NaHCO3)的方法構(gòu)建具有酸度敏感的三維支架，并使其攜載不同的藥物，作為抗炎和抗腫瘤的藥物載體應用于相應的動物模型中，以觀察其生物相容性、安全性，并探討其抗炎及抑制腫瘤的作用機制。與此同時，通過聚多巴胺(pDA)對載藥靜電紡纖維材料進行表面改性后，觀察其抑瘤效果的改變。
　　方法:
　　抗炎型靜電紡纖維的體外實驗:不

2、同組別的靜電紡纖維支架及其浸提液分別與大鼠成肌細胞株(L6)共培養(yǎng)，MTT法評估細胞毒性、TUNEL染色法檢測細胞凋亡?？寡仔挽o電紡纖維的體內(nèi)實驗，不同組別的靜電紡纖維支架分別植入皮膚，肌肉受損的大鼠皮膚與骨骼肌內(nèi)，在各時間點通過組織化學染色、免疫組織化學染色、PCR分析等技術手段檢測其對皮膚、骨骼肌的修復情況?？鼓[瘤型靜電紡纖維的體外實驗:不同組別的靜電紡纖維支架浸提液與人肝細胞癌細胞(HuH-7)、人乳腺癌細胞(MDA-231)共培

3、養(yǎng)，MTT法評估細胞毒性?？鼓[瘤型靜電紡纖維的體內(nèi)實驗，不同組別的靜電紡纖維支架分別植入裸鼠皮下肝癌瘤體切除后的殘癌內(nèi)，在各時間點通過組織化學染色、免疫組織化學染色、ELISA檢測、PCR分析等技術手段檢測其對殘癌的抑制情況。
　　結(jié)果:
　　1.抗炎型靜電紡纖維的體外實驗中，MTT分析不同組別的靜電紡纖維支架及其浸提液對L6細胞無毒性;TUNEL染色顯示不同組別的靜電紡纖維支架浸提液對細胞凋亡無明顯促進作用。抗炎型靜電紡纖

4、維支架的體內(nèi)實驗中，HE染色結(jié)果顯示其可顯著控制過度炎癥反應，對大鼠骨骼肌急性損傷的愈合有明顯促進作用;免疫組化與PCR結(jié)果顯示抗炎型靜電紡纖維支架可抑制促炎型細胞因子（IL-6和TNF-α）的表達，而對促增生型細胞因子(VEGF、b-FGF、TGF-1)的表達有促進作用。抗炎型靜電紡纖維支架對大鼠皮膚急性損傷的愈合也有明顯促進作用，HE染色顯示其可顯著控制過度炎癥反應，減少皮膚膠原的沉積;免疫組化與Western blot結(jié)果顯示抗炎

5、型靜電紡纖維支架對細胞因子b-FGF的表達有促進作用，而對a-SMA的表達有抑制作用;PCR結(jié)果顯示collagenⅠ/collagenⅢ和TGF-β1/TGF-β3的比率降低，而MMP-1/TIMP-1的比率增高，提示抗炎型靜電紡纖維支架可減少皮膚疤痕組織的形成，有利于皮膚無疤痕愈合。
　　2.抗腫瘤型靜電紡纖維的體外實驗中，MTT分析不同組別的靜電紡纖維支架浸提液對Huh-7、MDA-231腫瘤細胞增殖有明顯抑制作用?？鼓[瘤型

6、靜電紡纖維支架的體內(nèi)實驗表明其對殘癌有明顯抑制作用，HE染色結(jié)果顯示其可引起腫瘤細胞凋亡;ELISA結(jié)果顯示其可減少CRP的表達;免疫組化、ELISA、Westernblot與PCR結(jié)果綜合顯示抗腫瘤型靜電紡纖維支架早期可控制炎癥反應，抑制炎癥因子的表達，后期持續(xù)抑制腫瘤細胞增殖，下調(diào)IL-6，STAT3和NF-κB的表達，上調(diào)Caspase-3表達，并上調(diào)Bcl-2/Bax比值。經(jīng)pDA表面改性后的載藥靜電紡PLLA纖維支架，親水性增

7、強，抑瘤效果顯著提高。
　　結(jié)論:
　　抗炎型靜電紡纖維支架對大鼠皮膚、骨骼肌急性損傷的愈合有明顯促進作用，可顯著控制過度炎癥反應，加速愈合;并通過對疤痕形成相關的細胞因子的調(diào)節(jié)，實現(xiàn)皮膚無疤痕愈合?？鼓[瘤型靜電紡纖維支架對殘癌有明顯抑制作用，可實現(xiàn)早期對炎癥因子的控制，后期長效抗腫瘤的作用。酸性敏感靜電紡纖維支架可作為安全的藥物載體對疾病進行有效的治療;經(jīng)pDA修飾的載藥靜電紡PLLA纖維支架可以作為有效的藥物載體，用于對