黑龍江省野生黑木耳菌種的遺傳多樣性分析.pdf

1、黑木耳是一種美味食用菌,同時又具有很高的藥用價值,黑龍江省是我國黑木耳主產(chǎn)區(qū),其生產(chǎn)的黑木耳暢銷國內(nèi)外,黑木耳產(chǎn)業(yè)的發(fā)展對促進黑龍江的經(jīng)濟和社會發(fā)展起了重要的推動作用。本研究主要是開展我國黑龍江省部分地區(qū)的野生黑木耳菌株的分子指紋分析研究,客觀的評價黑龍江省的野生黑木耳菌株種質(zhì)資源的遺傳多樣性,用于充分保護和利用野生黑木耳種質(zhì)資源,開展黑木耳的良種選育,為將來雜交育種親本的選擇提供很好的理論依據(jù)。
　　 本研究從黑龍江省境內(nèi)各地

2、區(qū)范圍內(nèi)收集了30個野生黑木耳菌株,應用DNA標記技術(shù)(ITS、SRAP)對此進行了分子指紋分析。主要研究結(jié)果如下:
　　 1)本試驗對采集自黑龍江省部分地區(qū)的30個野生黑木耳菌株采用組織分離法中的子實體分離的方法,將生長于木椴上的野生黑木耳,經(jīng)多步分離和培養(yǎng),以及出耳實驗等方法,證明分離到的菌株為黑木耳菌株。
　　 2)ITS序列分析結(jié)果顯示:所有供試菌株的ITS序列長度均為559bp,其中ITS1區(qū)長167bp,含有

3、4個變異位點;ITS2區(qū)序列長度為234bp,變異位點較多,為12個;介于ITS1區(qū)于ITS2區(qū)之間的5.8SrDNA序列較保守,長度為158bp,只含有2個變異位點。所有供試菌株中ITS1的(G+C)％變化范圍為:47.0％～52.0％,ITS2的(G+C)％變化范圍為:49.4％～50.1％,ITS序列間的遺傳距離變化范圍為0.000～0.013,平均為0.006,ITS分析顯示菌株之間的遺傳差異較小。
　　 3)從56個S

4、RAP引物組合中篩選出能同時對所有供試菌株進行擴增的8對引物組合,分別是:em2+me3,em2+me6,em5+me4,em6+me1,em6+me6,em7+me5,emT+me6,em8+me4,用上述篩選出的引物對供試菌株進行擴增,并對其擴增圖譜進行聚類分析。SRAP結(jié)果表明,8對引物共擴增出157條重復性良好的DNA條帶,其中多態(tài)性條帶122條,占77.71％;使用UPGMA(UnweightedPair-GroupMetho