應(yīng)用原子力顯微鏡研究熱刺激作用下血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)及膜彈性變化.pdf

1、本文利用帶有精確控溫加熱工作臺(tái)的生物型原子力顯微鏡在接近生理?xiàng)l件下，觀察到了細(xì)胞表面應(yīng)力纖維等微觀結(jié)構(gòu)的形態(tài)與分布，同時(shí)測(cè)量了細(xì)胞表面彈性在1.37-6.12kPa。對(duì)同一細(xì)胞37℃、42℃加熱半小時(shí)觀測(cè)發(fā)現(xiàn)加熱后細(xì)胞形態(tài)變化明顯，表面應(yīng)力纖維開(kāi)始消失。在此基礎(chǔ)上，使用Force Volume技術(shù)對(duì)整個(gè)細(xì)胞彈性進(jìn)行全局研究，利用Hertz模型對(duì)測(cè)得的數(shù)據(jù)計(jì)算，發(fā)現(xiàn)加熱后細(xì)胞表面楊氏模量減小且各點(diǎn)間的差異減小。上述現(xiàn)象從一個(gè)方面反映了胞內(nèi)

2、骨架在熱應(yīng)力作用下趨向解聚的過(guò)程。由此推測(cè)，受熱后血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞內(nèi)骨架，特別是微絲開(kāi)始解聚，熱刺激胞內(nèi)支撐體系的破壞致使細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞之間連接的破壞，使整個(gè)內(nèi)皮細(xì)胞層結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，內(nèi)皮層通透性增大，不同粒徑的物質(zhì)部分將能夠通過(guò)間隙內(nèi)皮層屏障，從而應(yīng)該能夠大大增加藥物的滲透量。本文以建立活體細(xì)胞原子力顯微鏡成像與彈性測(cè)量方法為基礎(chǔ)，發(fā)展了新的圖像校正方法，并探索了溫?zé)嵝?yīng)對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)及表面彈性的影響，從而達(dá)到在細(xì)胞水平理解溫?zé)釛l件