腦微血管內(nèi)皮細胞相關病生理過程的原子力顯微術研究.pdf

1、在腦損傷相關疾病的研究中，研究腦損傷導致的血腦屏障結構和生理功能的變化，將有助于我們了解相關病癥的致病機制，并對治療藥物的藥效進行評估。作為一種高分辨的檢測手段，原子力顯微術(AFM)能夠在最接近生理環(huán)境的狀態(tài)下，獲得細胞等生物樣本的的高分辨三維形貌圖信息，以及其對生物樣本機械性質的定量檢測的能力，有望廣泛應用于生物學研究的各個方向。建立一個有效的體外血腦屏障細胞模型，并把AFM引入血腦屏障結構和生理功能的研究，必將使我們在相關病理研究

2、中獲得新的認識。
　　 本文建立了具有緊密聯(lián)合結構特點的大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞(rCMECs)體外培養(yǎng)模型，并進行了腦微血管內(nèi)皮細胞相關病生理過程的原子力顯微術研究。以大鼠腦皮質微血管段過濾法為基礎構建了適合AFM檢測的緊密聯(lián)合的rCMECs細胞模型，并使用AFM對rCMECs細胞進行形態(tài)學和機械學的表征。利用建立好的細胞模型，通過無血清培養(yǎng)和H202刺激處理模擬了體內(nèi)血腦屏障內(nèi)皮細胞的受損過程；并且將AFM檢測細胞表面形態(tài)特征、

3、熒光顯微術觀察藥物分子在細胞中的定位和細胞骨架變化以及細胞凋亡的檢測相結合，較為全面地評估了C60(C(COOH)2)2對rCMECs細胞的作用。研究發(fā)現(xiàn)，受損細胞表面會產(chǎn)生大量的囊泡結構，而這些結構很可能導致細胞層通透性的增大；C60(C(COOH)2)2能夠選擇性的進入氧化損傷的rCMECs細胞，抑制細胞凋亡和促進細胞骨架蛋白修復。通過修飾特異性識別AFM探針，對rCMECs表達的黏附相關因子進行識別檢測。本文建立的適合AFM檢測的