分子標(biāo)記輔助培育水稻萬金B(yǎng)抗稻瘟病近等基因系與基因聚合系.pdf

1、稻瘟病是由子囊菌Magnaporthe grisea(Hebert)Barr[無性世代為Pyriculariagrisea(cooke)Sacc.]引起的最具毀滅性的水稻病害之一。該病害在全世界水稻產(chǎn)區(qū)普遍發(fā)生。挖掘和利用廣譜持久抗性基因，培育水稻抗性品種是防治稻瘟病最經(jīng)濟(jì)有效的策略。Pi1、Pi2、Pik-h和 Pita-2是具有廣譜抗性的顯性主效水稻抗稻瘟病基因。本研究分別利用含Pi1、Pi2、Pik-h和Pita-2基因的水稻材料

2、C101LAC、C101A51、IRBLkh-K3和IRBLta2-Re或DV8作為稻瘟病抗性基因的供體親本，以保持系萬金 B為受體輪回親本，通過回交轉(zhuǎn)育結(jié)合分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)，獲得了一套以萬金 B為遺傳背景的抗稻瘟病近等基因系和基因聚合系，在此過程開發(fā)了適于Pita-2基因選擇的分子標(biāo)記，鑒定了近等基因系農(nóng)藝性狀的表現(xiàn)。主要研究結(jié)果如下：
　　1、利用萬金B(yǎng)與Pita-2基因供體DV8的雜交F2代群體鑒定和開發(fā)與Pita-2基

3、因緊密連鎖的分子標(biāo)記，共開發(fā)了11對(duì)InDel標(biāo)記引物，經(jīng)過篩選后其中有4對(duì)引物在萬金B(yǎng)及DV8之間存在多態(tài)，分別為InDel37、InDel39、InDel43、InDel45。利用這4對(duì)引物以及另外4對(duì)SSR引物對(duì)Pita-2基因進(jìn)行定位，確定Pita-2位于InDel標(biāo)記InDel39和SSR標(biāo)記RM28033之間，兩側(cè)標(biāo)記與Pita-2的遺傳距離均為0.4 cM，進(jìn)一步縮小了Pita-2基因所在區(qū)域的范圍，為Pita-2基因的選

4、擇提供了緊密連鎖的分子標(biāo)記。
　　2、通過抗性基因供體與受體親本雜種后代的回交和自交，并結(jié)合抗病基因 Pi1的分子標(biāo)記RM144和RM224、Pi2的分子標(biāo)記AP22和SRM24、Pik-h的功能性分子標(biāo)記Pikh、Pita-2的分子標(biāo)記RM28033和InDel39等進(jìn)行標(biāo)記選擇和抗性鑒定，在BC4F2代分別獲得了含純合抗病基因Pi1、Pi2、Pik-h和Pita-2的改良單株8株、7株、11株和9株；在BC5F1代分別獲得了含

5、Pi1、Pi2、Pik-h和Pita-2基因的改良單株18株、16株、21株和18株。基本育成了一套以萬金B(yǎng)為遺傳背景，分別含有Pi1、Pi2、Pik-h和Pita-2基因的近等基因系。
　　3、在含抗病基因的BC3F1代改良株系中，選擇遺傳背景恢復(fù)好的單株進(jìn)行抗性基因的聚合，結(jié)合自交和標(biāo)記選擇，在含不同基因的單株雜交的F1代獲得Pi1和Pi2基因聚合單株3株，Pik-h和Pita-2基因聚合單株5株；F1代聚合兩個(gè)基因的單株自交

6、得到含有純合抗病雙基因的F2代單株6株及12株；將Pik-h和Pita-2基因聚合株系與Pi2基因BC4F1代回交株系雜交，在雜交F1代獲得含Pik-h、Pita-2和Pi2基因聚合的單株4株。
　　4、對(duì)已獲得的近等基因系進(jìn)行遺傳背景檢測，含 Pi1基因的近等基因系遺傳背景恢復(fù)率為97.3％~98.4%，含Pi2基因的近等基因系遺傳背景恢復(fù)率為97.2%~98.3%，含Pik-h基因的近等基因系遺傳背景恢復(fù)率為97.7%~98.