Reelin缺失對(duì)小鼠皮質(zhì)片層化及細(xì)胞極性化的影響.pdf

1、細(xì)胞的分化及其極性變化是生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)問題，對(duì)于理解機(jī)體的發(fā)育、疾病的發(fā)生甚至細(xì)胞癌變有重要意義。目前，有關(guān)微環(huán)境中某些關(guān)鍵分子及其分子機(jī)制對(duì)細(xì)胞分化及極性改變調(diào)控方面的認(rèn)識(shí)還所知甚少。Reelin是由大腦皮質(zhì)發(fā)育過程中的 Cajal-Retzius（CR）細(xì)胞分泌的一種細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白。Reelin通過與其受體載脂蛋白E受體2（Apolipoprotein E Receptor2, ApoER2）和極低密度脂蛋白受體（Ver

2、y Low Density Lipoprotein Receptor, VLDLR）的結(jié)合，誘導(dǎo)胞內(nèi)效應(yīng)器Dab1磷酸化，指導(dǎo)遷移中神經(jīng)元有序地從放射狀膠質(zhì)細(xì)胞脫離下來，并定居在皮質(zhì)板相應(yīng)位置。所以說，Reelin是調(diào)控大腦皮質(zhì)片層化形成的關(guān)鍵因子。有研究證明 Reelin在神經(jīng)細(xì)胞遷移中發(fā)揮著具有吸引信號(hào)（go signal）、終止信號(hào)（stop signal）及調(diào)節(jié)、分泌特殊物質(zhì)等重要作用，Reelin的缺失可以造成 reelin基

3、因突變小鼠（reeler小鼠）皮質(zhì)片層化及細(xì)胞極性的紊亂，這些都可以說明 Reelin還可能是參與調(diào)節(jié)神咋經(jīng)細(xì)胞分化和極性化改變的重要分子。鑒于上述原因，為了證明 reelin與細(xì)胞極性、分化及皮質(zhì)片層化的關(guān)系，我們利用免疫組織學(xué)技術(shù)、 Nissl染色技術(shù)及 DiI示蹤技術(shù)對(duì)WT（Wild-tyPe）小鼠與 reeler小鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)微環(huán)境中細(xì)胞遷移及細(xì)胞分化、極性化的差異進(jìn)行著重考察研究，探討 Reelin蛋白作為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子對(duì)腦組

4、織中神經(jīng)細(xì)胞遷移及細(xì)胞分化、極性化改變的調(diào)節(jié)作用。因此了解 Reelin對(duì)細(xì)胞分化和極性化方面的調(diào)控作用對(duì)于揭示重大疾病的發(fā)病機(jī)理有著重要意義。
　　目的：探討 Reelin在皮質(zhì)片層化形成及細(xì)胞分化、極性化中的作用及相關(guān)機(jī)制。
　　方法：動(dòng)物分組為reeler小鼠和WT小鼠，每組內(nèi)分 E17、P0、P3、P7、P14、P216個(gè)年齡段。運(yùn)用免疫熒光標(biāo)記技術(shù)與5′-溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）法檢測兩組小鼠大腦發(fā)育中放射狀膠

5、質(zhì)細(xì)胞、增殖的神經(jīng)干細(xì)胞及極性蛋白的表達(dá)，并使用 Nissl染色技術(shù)及 DiI示蹤技術(shù)分別對(duì)新皮質(zhì)分子層發(fā)育、海馬 CA1區(qū)錐體細(xì)胞極性方位以及皮質(zhì)錐體細(xì)胞極性程度進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
　　結(jié)果：Reeler小鼠大腦發(fā)育中齒狀回內(nèi)放射狀膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量減少，極性紊亂，BrdU陽性細(xì)胞散在分布，數(shù)量減少；由于極性細(xì)胞未得到適當(dāng)?shù)慕K止信號(hào)越過皮質(zhì)Ⅱ?qū)舆M(jìn)入分子層，皮質(zhì)片層化的結(jié)構(gòu)是紊亂的。最后，對(duì)大腦皮質(zhì)及海馬錐體細(xì)胞極性統(tǒng)計(jì)得出 reeler小鼠細(xì)