蘋果園土壤微生物多樣性及酵母菌新種研究.pdf

1、本文通過盆栽試驗，采用微生物稀釋平板培養(yǎng)法對平邑甜茶、八棱海棠、楸子、新疆野蘋果、東北山荊子5種蘋果砧木土壤根際微生物數(shù)量、土壤酶活性及其相關(guān)性進(jìn)行研究；以2年生紅富士/平邑甜茶為試材，研究生草和覆蓋對蘋果根際土壤養(yǎng)分及微生物數(shù)量和群落代謝功能的影響；通過采集12個省(市)的81個蘋果園土壤樣品，采用微生物培養(yǎng)法研究了我國蘋果主產(chǎn)區(qū)果園土壤微生物特征：利用26SrRNA的D1/D2區(qū)域序列分析并結(jié)合形態(tài)學(xué)特征對紅富士蘋果園的酵母菌多樣性

2、進(jìn)行了研究，并基于形態(tài)、生理生化特征以及18SrRNA、ITS和26SrRNA基因D1/D2區(qū)基因序列對子囊菌酵母新種和擔(dān)子菌酵母新種進(jìn)行鑒定。主要結(jié)果如下：
　　 1.不同蘋果砧木土壤根際微生物各生理類群數(shù)量差異顯著，并且都以細(xì)菌占絕對優(yōu)勢，放線菌次之，真菌最少。不同蘋果砧木土壤根際蔗糖酶、磷酸酶、脲酶和過氧化氫酶活性各異。皮爾遜相關(guān)分析表明，土壤微生物數(shù)量與土壤酶活性之間存在相關(guān)關(guān)系。蘋果砧木根際土壤微生物多樣性指數(shù)依次為新

3、疆野蘋果＞平邑甜茶＞八棱海棠＞楸子＞東北山荊子。
　　 2.與傳統(tǒng)清耕栽培相比，生草和覆蓋處理均能顯著提高幼齡蘋果根際土壤養(yǎng)分含量；各處理幼齡蘋果根際土壤微生物以細(xì)菌占優(yōu)勢、放線菌次之、真菌最少，生草和覆蓋處理的根際土壤細(xì)菌、真菌、放線菌、自生固氮菌、纖維素降解菌和微生物總數(shù)量均顯著高于清耕。土壤微生物數(shù)量與土壤養(yǎng)分含量之間存在顯著相關(guān)性。生草和覆蓋均顯著增強(qiáng)土壤微生物利用碳源的能力，提高土壤微生物群落的功能多樣性，效果依次為白

4、三葉草＞黑麥草＞秸稈覆蓋＞清耕。
　　 3.土壤微生物各生理類群在我國蘋果主產(chǎn)區(qū)果園中的優(yōu)勢不同，細(xì)菌在各蘋果園土壤微生物中的比例均最高。Person相關(guān)分析表明，土壤微生物多樣性指數(shù)與土壤有機(jī)質(zhì)含量顯著正相關(guān)。不同省區(qū)蘋果園土壤微生物多樣性指數(shù)存在差異，依次為：黑龍江＞云南＞新疆＞山東＞北京＞寧夏＞山西＞遼寧＞河北＞河南＞甘肅＞陜西。對各地蘋果園土壤微生物數(shù)量進(jìn)行聚類分析可將各省蘋果園分為三類：黑龍江、遼寧；新疆、云南、陜西、

5、甘肅、山西、寧夏；河北、山東、北京、河南，與我國根據(jù)氣候和生態(tài)適宜標(biāo)準(zhǔn)劃分的蘋果主產(chǎn)區(qū)狀況基本吻合。
　　 4.紅富士果園中富含豐富的酵母資源，北京和山東兩果園的酵母菌種構(gòu)成明顯差異，并分別具有不同的優(yōu)勢屬。北京蘋果園共分離酵母菌129株，鑒定為13屬21種，優(yōu)勢屬為Pichia(4個種)，Cryptococcus(3個種)，Pseudozyma(3個種)，子囊菌占較大優(yōu)勢，分布于8屬12種，占總種數(shù)的57.1％。山東蘋果園共分

6、離酵母291株，鑒定為13屬26種，優(yōu)勢屬為Candida(6個種)，Pichia(4個種)和Cryptococcus(3個種)，并且子囊菌占較大優(yōu)勢，分布于7屬17種，占總種數(shù)的65.4％。
　　 5.從泰安蘋果園的土壤中分離到三株子囊菌酵母(TA11TR-1T，TA11TR-4和TA11TR-6)，根據(jù)表型特征及18SrRNA，ITS和26SrRNA基因D1/D2區(qū)基因序列分析表明，屬于Kazachstania屬。命名為Ka

7、zachstaniataianensissp.nov.(模式菌株TA11TR-1T=AS2.4160T=CBS11405T)。通過18S及D1/D2序列N-J比對得，K.taianensissp.nov.與Kazachstaniasinensis，Kazachstanianaganishii和Kazachstaniatelluris在同一個分支上。ITS-5.8SrDNA區(qū)總長度為983bp，長于已分離到的其它子囊菌酵母。
　　

8、 6.從泰安蘋果園中分離到4株擔(dān)子菌酵母(Y13-1T，Y2-1，Y6-3和Y8-2)，基于ITS和26SrRNA基因D1/D2區(qū)基因序列進(jìn)行系統(tǒng)聚類分析，在系統(tǒng)樹上這四個菌株聚類在Tremellomycetes的Kwoniella分支上，明顯區(qū)別于它們的最近緣種。與Cryptococcuscuniculi最接近，但遠(yuǎn)離于Kwoniellaheveanensis。因此定為新種，命名為Kwoniellashandongensissp.no