綠色木霉的篩選與產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵條件優(yōu)化及部分酶學(xué)性質(zhì)研究.pdf

1、從四川樂山井研縣收集到的土壤樣本中發(fā)現(xiàn)了具有纖維素酶活性的微生物,經(jīng)過選擇培養(yǎng)基初篩分離到43株能利用纖維素的菌株,再通過剛果紅染色法復(fù)篩到4株纖維素分解能力較強的菌株,最后挑選出一株酶活性最高的霉菌,經(jīng)形態(tài)學(xué)初步鑒定為木霉屬綠色木霉(Trichoderma viride).對分離到的菌株進行液態(tài)發(fā)酵,并對產(chǎn)酶發(fā)酵條件作了優(yōu)化.對所分離到的綠色木霉纖維素酶發(fā)酵液當(dāng)中的內(nèi)切葡聚糖酶組分進行了進一步分離提純工作.從中分離到一種具有單一內(nèi)切葡

2、聚糖酶活性的酶組分,能夠降解羧甲基纖維素鈉,但對結(jié)晶度高的脫脂棉及微晶纖維素沒有活性.對純化到的內(nèi)切葡聚糖酶的基本酶學(xué)性質(zhì)進行了研究.SDS-PAGE顯示該酶為單亞基單體蛋白,并測得其相對分子量為59.2KD.等電聚焦法測得該酶的PI為6.2左右,動力學(xué)方法測得該酶對最適底物CMC的Km值為4.86×10<'-2>g/ml.該酶的最適pH為5.0,在pH4~6有較強的穩(wěn)定性;最適反應(yīng)溫度為50℃,有一定的熱穩(wěn)定性,65℃下能長時間保持較