高產(chǎn)纖維素酶菌株的篩選及其產(chǎn)酶條件的優(yōu)化.pdf

1、木質(zhì)纖維是自然界最豐富的可再生資源，約占整個(gè)植物細(xì)胞干重的90％左右。一般來(lái)說(shuō)，木質(zhì)纖維素中含纖維素45％、半纖維素25％和木質(zhì)素30％。利用纖維素酶的催化作用，可以將纖維素組分降解為還原糖形式應(yīng)用于乙醇發(fā)酵等領(lǐng)域，并且不會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染和產(chǎn)生能量消耗。就目前國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀，纖維素酶活力不高是限制木質(zhì)纖維資源利用的主要因素之一，高產(chǎn)纖維素酶菌種的選育成為關(guān)鍵。
　　 利用羧甲基纖維素鈉培養(yǎng)法、剛果紅染色法、濾紙崩解法和胞外纖維素

2、酶活性測(cè)定法，從湖北神農(nóng)架保護(hù)區(qū)不同區(qū)域采集的森林腐質(zhì)土壤中分離篩選得到一株纖維素酶高產(chǎn)菌B-5。結(jié)合菌落形態(tài)觀察、顯微鏡觀察和ITS序列同源性分析，確定該菌株為鐮刀菌屬（Fusariumsp），與木賊鐮刀菌（FusariumEquiseti）相似度達(dá)99％。
　　 濾紙崩解實(shí)驗(yàn)顯示該菌72h對(duì)濾紙具有明顯崩解能力，失重率達(dá)37.9％。以羧甲基纖維素鈉為碳源，蛋白胨為氮源，28℃，180r/min，培養(yǎng)4d，其初始酶活為FPA酶

3、活(FPase)2.09IU/mL，CMC酶活(CMCase)5.20IU/mL。通過(guò)產(chǎn)酶條件優(yōu)化，確定稻草秸稈粉為唯一碳源，250mL的三角瓶中裝發(fā)酵液80mL，培養(yǎng)基初始pH為6.1，氮源添加量為1.0％，碳源添加量為2.5％，鼠李糖脂加量為0.1％，在溫度為28℃，搖床轉(zhuǎn)速為180r/min的條件下培養(yǎng)120h，最終B-5菌FPA酶活達(dá)到2.504IU/mL。
　　 研究得到鐮刀菌B-5所產(chǎn)纖維素酶酶促反應(yīng)的較適條件:40