五味子合劑干預(yù)糖尿病腎病小鼠腎小球纖維化進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察五味子合劑對糖尿病腎病小鼠腎小球纖維化進(jìn)展的影響，探討五味子合劑治療腎小球纖維化的可能機(jī)制。
　　 方法：雄性C57BL/6小鼠24只，6-7周齡，體重20-25g，隨機(jī)分為對照組6只、DN模型組9只、五味子合劑治療組9只，鏈脲菌素(Streptozotocin，STZ)125mg/kg兩次腹腔注射誘導(dǎo)DN小鼠模型。誘導(dǎo)成功后五味子合劑治療組給予五味子合劑灌胃。對照組和模型組給予等量自來水灌胃。分別于0、3、6、9周剪

2、尾取血用氧化酶法檢測血糖、用電子天平稱體重；實(shí)驗(yàn)結(jié)束前留尿用高效液相色譜法測尿蛋白、尿肌酐；動物處死時留右腎稱重。計算尿蛋白肌酐比(Urinary AlbuminCreatinine Ratio，ACR)，腎臟肥大指數(shù)即腎體重比(Kidney to Body Weight Ratio，KBWR)。腎組織，行PASM、Masson染色，光鏡下觀察腎組織形態(tài)改變，計算腎小球損傷指數(shù)(Glomerulosclerotic Injury，GSI

3、)。免疫組化檢查各組腎組織的纖粘蛋白(Fibronectin，F(xiàn)N)的表達(dá)，免疫熒光檢測各組抗原異簇31(Cluster ofDifferentiation31，CD31)和α-平滑肌肌動蛋白(α-Smooth Muscle Actin，α-SMA)的表達(dá)，western blot檢測各組α-SMA的表達(dá)。
　　 結(jié)果：與對照組相比模型組不同時期血糖明顯升高，體重下降，ACR、KBWR以及GSI明顯升高，且隨著病程的進(jìn)展，ACR

4、持續(xù)增加；模型組9W時PASM染色可見腎小球毛細(xì)血管面積增大、系膜區(qū)擴(kuò)張、系膜基質(zhì)增生及腎小球基底膜增厚、纖維性新月體形成；Masson染色及FN免疫組化可見腎小球系膜區(qū)及小管間質(zhì)區(qū)可見大量ECM沉積；Western blot結(jié)果顯示：隨著病程進(jìn)展，α-SMA表達(dá)持續(xù)上調(diào)。免疫熒光結(jié)果CD31的表達(dá)持續(xù)下調(diào)，α-SMA表達(dá)持續(xù)上調(diào)。與模型組相比，五味子合劑治療組在血糖和體重雖有一定程度的改善，但除三周外其余各期差異無統(tǒng)計學(xué)意義。ACR、