石油烴厭氧生物降解過程中的產(chǎn)甲烷古菌研究.pdf

1、本文主要以勝利油田羅801區(qū)塊的油井采出水為例,研究石油烴厭氧降解產(chǎn)甲烷過程中關(guān)鍵的功能微生物類群-產(chǎn)甲烷古菌.研究成果如下: 1.分離純化8株氫營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷古菌(編號(hào):CC-1,CC-2,CC-3,ZC-2,ZC-3,ZC-4,ZC-5,ZC-6)和一株甲基營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷古菌(ZC-1).16S rDNA序列系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析發(fā)現(xiàn)菌株CC-1與海沼甲烷球菌(Methanococcus maripaludis)相似性最高(100﹪);

2、菌株CC-3與短小甲烷卵圓形菌(Methanocalculuspumilus)相似性最高(99﹪);菌株ZC-2,3,6之間的相似性都在99﹪以上,它們與棕櫚油甲烷袋狀菌(Methanoculleuspalmaeoli)的相似性最高(97.4-97.6﹪);菌株ZC-1與竹節(jié)狀甲烷鬃毛菌(Methanosaeta harundinacea)相似性最高(90.6﹪).以MCR α亞基作為研究產(chǎn)甲烷古菌系統(tǒng)進(jìn)化的分子指標(biāo)發(fā)現(xiàn)菌株ZC-1與嗜

3、熱甲烷鬃毛菌(M.thermophila)的相似性最高(76.6﹪). 2.菌株ZC-1也是目前已知的生長溫度最高(70℃)的甲基營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷古菌,依據(jù)菌株ZC-1的生理生化和分子生物學(xué)特征把它命名為勝利甲烷嗜熱微球菌新屬新種(Methanothermomicrococcus shengliense gen.nov, sp.nov). 3.以油井采出水為接種物富集培養(yǎng),獲得了穩(wěn)定的氫營養(yǎng)型和甲基營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷古菌富集培養(yǎng)物

4、,沒有獲得穩(wěn)定的乙酸營養(yǎng)型產(chǎn)甲烷古菌富集培養(yǎng)物.以原油為唯一碳源富集培養(yǎng),55℃富集培養(yǎng)半年后有甲烷產(chǎn)生,產(chǎn)生的甲烷碳同位素值接近傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為的生物成因甲烷;原油飽和烴色譜圖中有明顯的"凸起",正構(gòu)烷烴含量逐漸減少,不知名化合物峰升高,少數(shù)甚至超過正構(gòu)烷烴的峰高;與好氧生物降解不同的是,長鏈正構(gòu)烷烴先于短鏈的被降解;同樣被厭氧微生物作用的原油,不同重復(fù)之間"凸起"現(xiàn)象不一致,表明即使在相同的降解時(shí)間內(nèi),厭氧微生物降解原油的效果也是存在差