油藏發(fā)酵細(xì)菌的鑒定及石油烴厭氧生物降解研究.pdf

1、本文采用已遭生物中等降解的原油為碳源，于高溫(60℃)富集培養(yǎng)，研究油層采出水中發(fā)酵性細(xì)菌的生理生化特性、代謝產(chǎn)物特征及不同代謝方式對石油烴厭氧生物降解的影響，目的是為了更全面地認(rèn)識油藏厭氧微生物菌群，更深入地研究石油烴厭氧代謝過程，更系統(tǒng)地研究微生物采油技術(shù)和厭氧生物修復(fù)技術(shù)的機理。 研究成果如下：(1)采用Hungate厭氧操作技術(shù)，自油層采出水中分離獲得了7株發(fā)酵性細(xì)菌，分別屬于4個不同的屬，菌株SC-2、SC-5、OX1

2、-1和LD2-1均屬于熱厭氧桿菌屬(Thermoanaerobacter)，菌株SD-2屬于脫硫腸狀菌屬(Desulfotomaculum)，菌株DS-1屬于脫硫弧菌屬(Desulfovibrio)，菌株L-5-2屬于熱袍菌屬(Thermosipho)。(2)通過生理生化鑒定，確定菌株SC-2、SC-5均為嚴(yán)格厭氧的嗜熱發(fā)酵性細(xì)菌(能耐受75℃)，利用葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生乙醇、乙酸、H2和CO2。(3)采用已遭生物中等降解的原油為碳源，分別在

3、硝酸鹽還原、硫酸鹽還原和產(chǎn)甲烷條件下，60℃富集培養(yǎng)6個月。實驗結(jié)果表明，3種代謝途徑下細(xì)菌群落都存在不同程度上的菌群結(jié)構(gòu)變化，產(chǎn)甲烷條件下古菌菌群結(jié)構(gòu)變化明顯?；蛭膸熘泄啪紝儆趶V古菌門(Euryarchaeota)，主要分為3大類—甲烷微菌目(Methanomicrobiales)、古球菌目(Archaeoglobales)和甲烷八疊球菌目(Methanosarcinales)。產(chǎn)甲烷條件下，生物厭氧降解后原油的瀝青質(zhì)和非烴含量均

4、有增加；隨著培養(yǎng)時間的延長，C2925-降藿烷/C30藿烷值不斷增大，C30藿烷有逐漸降解為C2925-降藿烷的趨勢。頂空氣體組分主要是甲烷和CO2，甲烷的碳同位素呈高負(fù)值(-66‰～-75.3‰)，二氧化碳的碳同位素偏重(-2.4‰～0.25‰)，符合公認(rèn)的生物成因甲烷的碳同位素標(biāo)準(zhǔn)(-100‰～-55‰)。這是國內(nèi)首次在嚴(yán)格厭氧條件下，通過不同的代謝方式于高溫條件下研究石油烴的生物降解過程，并且首次在國內(nèi)的研究報道中發(fā)現(xiàn)厭氧生物降解