艾迪莎對(duì)大鼠潰瘍性結(jié)腸炎MMP-2和TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、背景和目的：潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)是一種非特性炎癥性疾病，主要臨床表現(xiàn)為腹痛、腹瀉和粘液膿血便。UC的病變部位主要好發(fā)于直腸和結(jié)腸，其病因和發(fā)病機(jī)理目前尚不明確。潰瘍性結(jié)腸炎主要侵及腸道的黏膜層和黏膜下層，以腸道細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)的降解和黏膜潰瘍的形成為主要病理特點(diǎn)。目前認(rèn)為基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases，MMPs)在黏膜

2、的降解過(guò)程中起重要作用，并且認(rèn)為多種細(xì)胞因子也參與UC的發(fā)生和發(fā)展。當(dāng)前，氨基水楊酸類(lèi)藥物如艾迪莎和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazin，SASP)是治療潰瘍性結(jié)腸炎的主要和基本藥物。在本研究中，用艾迪莎和SASP治療TNBS誘導(dǎo)的大鼠潰瘍性結(jié)腸炎，以觀(guān)測(cè)它們對(duì)大鼠的一般狀態(tài)、疾病活動(dòng)指數(shù)（disease activityindex，DAI）評(píng)分及MMP-2和TNF-α表達(dá)的影響，并揭示它們治療潰瘍性結(jié)腸炎的機(jī)制，從而為今后更有效的治

3、療UC提供基礎(chǔ)理論依據(jù)。
　　 材料和方法：1、建立動(dòng)物模型：將禁食不禁水48小時(shí)的SD大鼠用水合氯醛腹腔注射麻醉后，予以100mg/kgTNBS和50％乙醇0.25ml混合液從肛門(mén)一次性注入。
　　 2、動(dòng)物分組：取144只六周齡雄性SD大鼠，體重180-220g，隨機(jī)分為4組，分別為：
　　 正常組(N)：鹽水灌腸，并予鹽水灌胃；
　　 艾迪莎組(A)：TNBS/乙醇混合液灌腸，并予艾迪莎80mg/k

4、g日兩次灌胃；
　　 SASP組(S)：TNBS/乙醇混合液灌腸，并予SASP120mg/kg日兩次灌胃；
　　 模型組(C)：TNBS/乙醇混合液灌腸，并予鹽水灌胃。
　　 3、觀(guān)察大鼠的一般狀態(tài)、疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分，并分別于灌腸后第3、7、14、21、35、56天處死動(dòng)物，每組6只，取病變結(jié)腸為組織標(biāo)本，部分組織置于液氮中凍存，用于進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)，部分組織用10%的甲醛固定

5、，HE染色用于光鏡下觀(guān)察組織病理學(xué)改變，和免疫組織化學(xué)分析。
　　 4、免疫組化方法測(cè)定大鼠結(jié)腸黏膜MMP-2和TNF-α的蛋白表達(dá)。
　　 5、RT-PCR方法測(cè)定大鼠結(jié)腸黏膜MMP-2和TNF-α的mRNA表達(dá)。
　　 結(jié)果：1、大鼠的一般狀態(tài)和DAI評(píng)分及光鏡下組織病理學(xué)觀(guān)察均有明顯改變提示大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型成功。艾迪莎組和SASP組的大鼠的一般狀態(tài)、DAI評(píng)分和病理組織改變都有顯著的改善
　　

6、2、免疫組化檢測(cè)到模型組大鼠組織的MMP-2和TNF-α的表達(dá)明顯高于正常組、艾迪莎組和SASP組，兩組之間比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 3、RT-PCT檢測(cè)到模型組大鼠組織的MMP-2和TNF-α在模型組中的表達(dá)明顯高于正常組、艾迪莎組和SASP組，兩組之間比較有顯著性差異(P＜0.05)。
　　 4、SASP組和艾迪莎組在RT-PCR檢測(cè)和免疫組化檢測(cè)中對(duì)比無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　 結(jié)