電導檢測型DNA微陣列系統(tǒng)的研制.pdf

1、很少有科學領域象DNA檢測或診斷一樣在近年來有如此之快的發(fā)展.隨著人類基因組計劃的完成,它所提供的巨大的信息量為DNA檢測構建起了一個平臺.在眾多的DNA檢測方法中,DNA傳感器以其操作簡單,儀器成本低廉,檢測快速等特點成為研究的熱點.該論文的主要目的是研制一種基于電導檢測的DNA檢測系統(tǒng).它集成DNA雜交檢測和信號采集于一體,具有靈敏度高、選擇性好、體積小等特點,可以適用于疾病檢測、生物鑒定等領域.論文的主要內容如下:1.該文利用熒光

2、和同位素的標記方法對DNA探針在玻璃基片上的固定與雜交過程進行了系統(tǒng)地優(yōu)化,包括基片的清洗、手臂分子的選擇、固定、探針長短、雜交以及后處理等.得到了一套優(yōu)化的實驗條件,這樣可以在很大程度上保證得到均勻的而且強的雜交圖案.2.該文提出了一種簡單而通用的方法對基于納米金顆粒的DNA檢測方法進行有效的放大.通過這種方法對DNA雜交的電學檢測放大后,雜交信號增強了至少3個數(shù)量級,同時沒有對該檢測方法的選擇能力產生影響.實驗表明,該方法對DNA單

3、堿基的識別率達到了10<'9>:1.目前還沒有文獻報道過這么大的差別.3.該文應用電導檢測的方法對PCR產物進行了檢測,開發(fā)出了一套用于同時檢測多個PCR產物的方法,擴大了電導檢測方法的應用范圍.實驗證實這種方法可以用于實際樣品的檢測,并且該方法對DNA單堿基的識別率也達到了10<'9>:1.4.該文利用標準微電子加工技術開發(fā)出兩種制備微米級DNA檢測單元的方法.一種是利用與微電子加工技術兼容的材料進行選擇和處理,成功地實現(xiàn)了選擇性地將