鮮食葡萄新品種‘鄞紅’的遺傳分析及其生物學(xué)特性研究.pdf

1、葡萄是葡萄科(Vitaceae)葡萄屬(Vitis L.)植物，是世界主要水果之一。我國以鮮食葡萄生產(chǎn)為主，其產(chǎn)量居世界第一位，浙江省為我國南方鮮食葡萄的主要產(chǎn)地之一。本論文以45個(gè)主要栽培葡萄品種為材料，采用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對其親緣關(guān)系及遺傳多樣性進(jìn)行分析，旨在為葡萄雜交育種和產(chǎn)業(yè)健康、持續(xù)地發(fā)展提供理論指導(dǎo);‘鄞紅’為浙江省優(yōu)良鮮食葡萄品種，2011年通過品種審定，選擇與‘鄞紅’葡萄遺傳相似度較高的巨峰和藤稔為對照，從物候期、生

2、長結(jié)果特性、抗病性、果實(shí)品質(zhì)、光合特性和產(chǎn)量等方面進(jìn)行了品種對比試驗(yàn)。主要研究結(jié)果如下:
　　 (1)用改良后的CTAB法制備的DNA無凝膠狀物質(zhì)、蛋白質(zhì)和酚類物質(zhì)，適合ISSR-PCR擴(kuò)增。
　　 (2)確定了適合本試驗(yàn)葡萄樣品的ISSR反應(yīng)的體系為:10×buffer(含Mg2+)2.0μl，模板DNA為2.5ng/μl，Taq DNA聚合酶1U，dNTPs0.2mM，引物0.2μM，總體積為20μl。ISSR反應(yīng)擴(kuò)

3、增程序?yàn)?94℃預(yù)變性5min，94℃變性45s，50-60℃退火1min，72℃延伸1.5min，進(jìn)行40個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸7min，4℃保存。
　　 (3)從100條引物中篩選出了26條帶型清晰、重復(fù)性高、多態(tài)性較好的引物，對45個(gè)葡萄品種進(jìn)行PCR擴(kuò)增，結(jié)果表明:共擴(kuò)增出310條帶，其中多態(tài)性條帶283條，多態(tài)性位點(diǎn)百分率為91％。擴(kuò)增條帶最少的是UBC814，為3條，最多的為UBC857，達(dá)23條，平均帶數(shù)為12條，

4、且引物擴(kuò)增長度在200-2000bp之間。多態(tài)性百分率最高的引物為UBC880、UBC814、UBC817、UBC824、UBC827、UBC834、UBC855、UBC857和UBC809，均達(dá)100％，最低的是UBC826，為75％。
　　 (4)利用NTsys2.10e軟件計(jì)算45個(gè)葡萄品種的遺傳相似系數(shù)，其變化范圍在0.603-0.908之間。利用UPGMA法構(gòu)建聚類樹狀圖。在相似系數(shù)為0.756處將45個(gè)供試品種分為兩

5、個(gè)類群，歐亞種群和歐美雜種群。第一類歐亞種群包含金手指、白雞心、金田玫瑰、秦龍大穗等25個(gè)品種;第二類歐美雜種群由超紅、巨玫瑰、瑰香怡等20品種組成。新品種‘鄞紅’與巨峰和藤稔的遺傳相似度較高，美峰和美秋與宇選4號的遺傳相似系數(shù)分別為0.902和0.898，推測二者可能屬于歐美雜種。
　　 (5)‘鄞紅’品質(zhì)優(yōu)良，果粒大小均勻，很少出現(xiàn)小果?，F(xiàn)象，果穗整齊，著色均勻。果肉硬度較高，采后果穗不容易落粒，不易變質(zhì)，貯藏性能好，果實(shí)含