污水中糞厭氧菌基因標(biāo)記物含量的影響因素及變化規(guī)律研究.pdf

1、水環(huán)境污染問題主要涉及點(diǎn)源污染和非點(diǎn)源污染,當(dāng)前點(diǎn)源污染受到世界各地政府的普遍關(guān)注,西方歐美的一些發(fā)達(dá)國(guó)家開展了大量的實(shí)驗(yàn)研究對(duì)點(diǎn)源污染達(dá)到了有效的控制和治理。而對(duì)非點(diǎn)源污染的研究鮮有報(bào)道,非點(diǎn)源污染在美國(guó)相關(guān)法案中被定義為“污染物以廣域的、分散的、微量的形式進(jìn)入地表及地下水體”。與點(diǎn)源污染相比,非點(diǎn)源污染具有涉及范圍廣、隱蔽性強(qiáng)、隨機(jī)性大、潛伏周期長(zhǎng)、累積性高等特點(diǎn),使其監(jiān)測(cè)難度大、難以量化,目前已成為影響水環(huán)境質(zhì)量的主要污染來源。因

2、而尋找一種能夠有效監(jiān)測(cè)非點(diǎn)源污染的技術(shù)成為當(dāng)今社會(huì)對(duì)污染源研究的熱點(diǎn)。
　　MST(Microbial Source Tracking)技術(shù)是20世紀(jì)90年代中期發(fā)展起來的新技術(shù),被稱為是一種能把非點(diǎn)源污染監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)化為點(diǎn)源污染監(jiān)測(cè)的技術(shù)。本論文就針對(duì)非點(diǎn)源污染中的糞便污染展開研究。經(jīng)過查閱大量資料和多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,采用HF183F-Bac708R和Biado1-Biado2作為人類糞便特異性指示菌的引物對(duì),采用DF475F-Bac70

3、8R作為狗類糞便特異性指示菌的引物對(duì),分別建立了各種引物從DNA提取到PCR定性定量檢測(cè)的完整方法。選用細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒提取環(huán)境水體中的總細(xì)菌DNA,通過PCR儀的溫度梯度功能分別對(duì)PCR檢測(cè)體系和退火溫度進(jìn)行了優(yōu)化,提高了PCR的檢測(cè)效果,確定了特異性標(biāo)記物的PCR檢測(cè)方法。
　　在定性檢測(cè)方法的基礎(chǔ)上建立了幾種特異性指示菌定量PCR檢測(cè)方法。研究還分別采用了重組質(zhì)粒和細(xì)菌基因組DNA作為標(biāo)準(zhǔn)模板來建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,并比較