姜黃素對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎癥及內(nèi)臟痛敏的預(yù)防和治療作用.pdf

1、背景：
　　炎癥性腸?。↖nflammatory bowel disease,IBD）常表現(xiàn)出腹痛等臨床癥狀，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量，臨床上尚缺乏有效的治療手段，抑制炎癥和拮抗參與疼痛信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的換能分子可能是治療IBD誘發(fā)疼痛的關(guān)鍵所在。眾所周知，炎癥和辣椒素受體（Transientreceptor potential vanilloid1,TRPV1）的相互作用在慢性內(nèi)臟痛的發(fā)生中發(fā)揮了重要作用，而且5-羥色胺（5-hydroxytr

2、yptamine,5-HT）在腸道的炎癥反應(yīng)中發(fā)揮了重要作用。姜黃素是具有多靶點(diǎn)效應(yīng)的多酚，具有抗炎鎮(zhèn)痛等效應(yīng)。本研究旨在探討姜黃素對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎癥和內(nèi)臟痛敏的治療效應(yīng)，并進(jìn)一步探討TRPV1和5-HT在姜黃素治療效應(yīng)中的作用機(jī)制。
　　方法：
　　大鼠連續(xù)7天自由飲用5%多聚葡酸鈉（Dextran sulfate sodium,DSS）水溶液建立潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative Colitis,UC）模型，分別預(yù)防性和治

3、療性給予姜黃素（60mg/kg，每日一次灌胃處理），其中預(yù)防組自建立模型第1日開(kāi)始，治療組從第4日開(kāi)始，連續(xù)10天，通過(guò)觀察大鼠疾病活動(dòng)指數(shù)（Disease activity index,DAI）和結(jié)腸組織病理評(píng)分評(píng)價(jià)姜黃素的抗炎效應(yīng)；通過(guò)充脹結(jié)直腸觀察腹部收縮反射（Abdominal withdrawal reflex,AWR）評(píng)價(jià)姜黃素的鎮(zhèn)痛效應(yīng)；通過(guò)免疫印跡方法觀察姜黃素對(duì)5-HT合成限速酶色氨酸羥化酶（Tryptophan hy

4、droxylase,TPH）、TRPV1和磷酸化（Phosphorylated，p）TRPV1表達(dá)的影響；利用膜片鉗方法在穩(wěn)轉(zhuǎn)人（Human,h）TRPV1的HEK293細(xì)胞上觀察姜黃素對(duì)TRPV1通道功能的影響，利用免疫印跡方法觀察姜黃素對(duì)細(xì)胞膜（Membrane，m）TRPV1表達(dá)的影響；用蛋白激酶 C激活劑PMA處理細(xì)胞后觀察姜黃素對(duì)mTRPV1表達(dá)的影響。
　　結(jié)果：我們研究發(fā)現(xiàn)，
　　1）DSS引起大鼠結(jié)腸組織出現(xiàn)

5、UC組織病理學(xué)改變，DAI 評(píng)分上升，AWR評(píng)分明顯升高，結(jié)腸黏膜中5-HT免疫陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞數(shù)量增加，TRPV1和TPH蛋白水平明顯升高；
　　2）與對(duì)照組相比，預(yù)防性給予姜黃素能減輕結(jié)腸組織病理評(píng)分，可降低DAI評(píng)分，也可以減輕AWR評(píng)分；可抑制炎癥結(jié)腸組織中pTRPV1蛋白水平；
　　3）與對(duì)照組相比，治療性給予姜黃素對(duì)結(jié)腸組織病理評(píng)分及DAI評(píng)分無(wú)影響，但是能明顯減輕AWR評(píng)分，另外能降低炎癥結(jié)腸組織中TR

6、PV1和TPH的蛋白水平，同時(shí)也能減弱pTRPV1蛋白水平；
　　4）在穩(wěn)轉(zhuǎn)hTRPV1的HEK293細(xì)胞中，姜黃素劑量依賴(lài)性地抑制辣椒素引起的膜內(nèi)流；另外姜黃素（10?M）能明顯降低mTRPV1的表達(dá)，同時(shí)姜黃素（1和3?M）也能抑制PMA引起的mTRPV1蛋白水平上調(diào)。
　　結(jié)論：
　　在整體水平上，預(yù)防性和治療性給予姜黃素均能減輕內(nèi)臟痛敏和抑制炎癥結(jié)腸組織中TRPV1磷酸化蛋白水平；在細(xì)胞水平上，姜黃素能抑制TR