姜黃素對(duì)DSS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的作用機(jī)制的研究.pdf

1、目的:通過(guò)姜黃素干預(yù)DSS誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型，檢測(cè)p-STAT3蛋白、STAT3mRNA的表達(dá)量，從而探討姜黃素通過(guò)STAT3通路對(duì)小鼠UC的作用，以及姜黃素對(duì)環(huán)氧合酶-2(COX2)、過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體(PPARγ)的影響。
　　方法:將雌性BALB/c小鼠60只，體重15-25g，按隨機(jī)表分為A、B、C、L、M、H六組，每組10只， A組:正常對(duì)照組;B組:模型組;C組:地塞米松干預(yù)組（1.5mg/kg.d）;L

2、組:姜黃素低劑量組（25mg/kg.d）;M組:姜黃素中劑量組（50mg/ kg.d）;H組:姜黃素高劑量組(100mg/kg.d)。A組小鼠每日自由飲水，其余組小鼠連續(xù)自由飲用5％DSS溶液7天，在造模的同時(shí)每日給予小鼠腹腔注射藥物，A組注射等體積生理鹽水，B組注射2.5％乙醇溶液，C組注射地塞米松，L、M、H組分別注射上述低、中、高劑量姜黃素。每日稱重，并觀察小鼠的進(jìn)食、活動(dòng)、毛色及大便形狀，以及觀察大便隱血情況，進(jìn)行疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)

3、分。造模第8天處死全部小鼠，取出結(jié)腸宏觀觀察后，一部分用于包埋切片，做HE染色觀察結(jié)腸組織學(xué)改變，以及免疫組化測(cè)PPARγ、STAT3。三部分組織放于液氮中備用，取一份用于ELISA測(cè)COX-2的表達(dá)，一份用于Western blot測(cè)p-STAT3的表達(dá)，一份用于RT-PCR測(cè)STAT3mRNA的表達(dá)。
　　結(jié)果:1.B組小鼠癥狀、組織學(xué)都符合UC標(biāo)準(zhǔn)，DAI評(píng)分和組織學(xué)評(píng)分均高于A組，C、L、M、H組DAI評(píng)分和組織學(xué)評(píng)分較B

4、組都有不同程度的下降。2.免疫組織化學(xué)結(jié)果:B組小鼠結(jié)腸PPARγ（23.00±5.92）低于A組（41.14±9.56），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)， C組（64.27±20.41）、L組（30.74±7.67）、M組（36.86±16.79）、H組（63.84±20.74）高于B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，C組與H組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);B組小鼠結(jié)腸STAT3（27.15±11.91）較A組(67.12±

5、17.04)、C組（29.94±10.38）、L組(44.21±12.84)、M組（29.16±9.03）、H組（20.44±7.30）高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，M組與C組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。3.ELISA測(cè)COX-2結(jié)果:與B組相比，C、L、M、H組COX-2含量較B組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。與C組相比，L、M組COX-2含量比C組低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，H組評(píng)分與C組差異統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)

6、意義(P＞0.05)。于L組相比，M、H組含量低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。M組與H組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。4.Western blot檢測(cè)小鼠結(jié)腸p-STAT3蛋白的表達(dá):B組p-STAT3蛋白水平相比A組明顯上升，C、L、M、H組水平較B組降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。5.RT-PCR方法檢測(cè)結(jié)腸組織STAT3 mRNA的表達(dá):B組STAT3 mRNA表達(dá)水平相比A組明顯上升，C、L、M、H組水平