耐低溫反硝化菌的選育及其脫氮特性研究.pdf

1、以實(shí)驗(yàn)室運(yùn)行良好的CAST系統(tǒng)模擬反應(yīng)器內(nèi)的活性污泥作為泥種，進(jìn)行低溫反硝化菌的富集及定向選育，并篩選出了三株具有不同脫氮特性的耐低溫反硝化菌，分別命名為L(zhǎng)TD-03、LTD-05及LTD-16。
　　 LTD-03平板上的菌落扁平，中間有突起，顏色為不透明的白色，邊緣卷曲狀，菌落較軟，菌液為白色懸濁液，普通光學(xué)顯微鏡觀察和電鏡掃描發(fā)現(xiàn)菌體為橢圓球狀，大小為約為40μm×90μm，無鞭毛;LTD-05的平板菌落呈枕狀，顏色為檸檬

2、黃色，邊緣光滑，有光澤，菌落較軟，菌液顏色呈淺黃色懸濁液，普通光學(xué)顯微鏡及電鏡掃描發(fā)現(xiàn)，菌體呈球形，直徑約為40μm，無鞭毛;LTD-16平板菌落呈枕狀，灰白色，邊緣光滑，有光澤，菌落質(zhì)地較硬，有蠟質(zhì)感，菌液為白色懸濁液，普通光學(xué)顯微鏡觀察和電鏡掃描發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)桿菌，長(zhǎng)度約為90μm，無鞭毛。經(jīng)革蘭氏染色，鑒定LTD-03為革蘭氏陰性菌，LTD-05為革蘭氏陽(yáng)性菌，LTD-16為革蘭氏陽(yáng)性菌。經(jīng)16SrDNA測(cè)序及序列分析，LTD-03與Ps

3、eudochrobactrumasaccharolyticum、 LTD-05與 Arthrobacter soli、 LTD-16與 Thaueramechernichensis的相似性均分別達(dá)到99％以上。
　　 通過對(duì)三株菌的生長(zhǎng)特性研究發(fā)現(xiàn)，三株菌均對(duì)醋酸鈉的利用最佳;LTD-03、LTD-05的最佳生長(zhǎng)溫度均為30℃，LTD-16最佳生長(zhǎng)溫度為40℃;三株菌的最佳ph范圍菌為7～9;搖床培養(yǎng)時(shí)三株的生長(zhǎng)和繁殖情況均受裝

4、液量的影響，最佳裝液量為300mL～400mL之間;LTD-03適應(yīng)期0～12h，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期12～36h，穩(wěn)定期為36～52h，衰亡期為52～96h;LTD-05的適應(yīng)期為0～12h，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為12～32h，穩(wěn)定期為32～40h，衰亡期為40～96h;LTD-16的適應(yīng)期為0～8h，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為8～28h，穩(wěn)定期為28～36h，衰亡期為36～96h。采用比濁法測(cè)定OD600值，最大OD600均可達(dá)到1.2以上。
　　 三株菌均

5、有較廣的反硝化溫度應(yīng)用范圍，可在多種溫度環(huán)境下進(jìn)行反硝化，但不同的溫度下反硝化活性不同。較高溫度時(shí)反硝化速率高于較低溫度時(shí)，但在40℃反硝化開始受抑制;三株菌在高初始硝酸鹽氮濃度下的反硝化速率遠(yuǎn)高于低初始硝酸鹽氮濃度;經(jīng)低溫馴化后，三株菌在低溫下反硝化的適應(yīng)時(shí)間均較未經(jīng)馴化的菌株短，去除的速率也較未經(jīng)馴化的菌株快;三株菌的低溫反硝化能力均受pH的影響較大，最適pH均在堿性范圍內(nèi);三株菌均不利用或較少利用氨氮，但高濃度氨氮均抑制菌株的低溫