瀕危植物美花石斛基于菌根真菌的再引入技術(shù)初步研究.pdf

1、石斛屬原生種具有開發(fā)價值和經(jīng)濟(jì)價值的數(shù)量居于蘭科之首,是重要的種質(zhì)資源。目前,由于野生資源的過度采挖,已使大多蘭科植物被列入珍稀瀕危植物行列。因而重建原有種群的呼聲日漸高漲,蘭科植物的保育事業(yè)正備受矚目。再引入是繼就地保護(hù)和遷地保護(hù)等保護(hù)策略之外的一種新興的珍稀瀕危植物保育方式。目前國際上再引入技術(shù)的研究剛起步,高度成功的還不多,目前可借鑒的成熟經(jīng)驗也較少,主要影響因素是所選址的再引入環(huán)境條件不適合及對目標(biāo)植物種類的生物學(xué)、生態(tài)學(xué)知識缺

2、乏。
　　 蘭科是典型的菌根植物,因而其再引入的開展相對比較困難。本研究以中國傳統(tǒng)藥用石斛中的美花石斛為對象,通過分離篩選有益共生菌并分析其生物學(xué)特性,探討菌根化育苗技術(shù),在此基礎(chǔ)上初步研究影響美花石斛再引入成活率和野外環(huán)境適應(yīng)性的主要因素。以期建立瀕危蘭科植物美花石斛的再引入技術(shù)體系,為規(guī)?；斯ぴ耘嗵峁┛茖W(xué)依據(jù)。主要結(jié)果如下:
　　 (1)不同采樣點及采樣植株個體內(nèi)生真菌分離率存在著較大的差異。
　　 各采樣

3、點美花石斛的內(nèi)生真菌分離率存在著較大的差異,最高可達(dá)91.00％,最低僅為10.42％。低海拔區(qū)域分離率較低,石灰?guī)r、玄武巖較花崗巖采樣的植株分離率稍高,內(nèi)生真菌的豐富度可在一定程度上反映生境中真菌分布的情況,可用來估測適合蘭科植物生存的環(huán)境;11個有益共生菌株通過分子鑒定分別為瘤菌根菌屬(Epulorhiza)1個、膠膜菌屬(Tulasnella)2個、燒瓶狀霉屬(Lecythophora)1個、枝頂孢屬(Acremonium)1個及

4、6個未定種,多數(shù)為擔(dān)子菌門和子囊菌門。
　　 (2)對美花石斛組培苗顯著促生的菌株一般具有較強(qiáng)的解磷和解纖維素能力。
　　 10株美花石斛有益內(nèi)生真菌中有7株產(chǎn)生不同大小的解磷圈,根據(jù)解磷圈清晰程度,篩選出具有較強(qiáng)解磷能力的菌株3株,其中F13解磷圈出現(xiàn)的最早;B14解磷能力最強(qiáng),HD/CD值為1.58,F24a次之;獲得產(chǎn)生較清晰水解圈的解纖維素菌株5個,其中,F25的D/d值達(dá)到3.88。通過與植株共生培養(yǎng)發(fā)現(xiàn),對美

5、花石斛組培苗顯著促生的2個菌株F9及F24a均具有較強(qiáng)的解磷和解纖維素能力。
　　 (3)不同菌株在不同的共生培養(yǎng)時期以及植株苗齡的差異都會對美花石斛組培苗生物量的促進(jìn)產(chǎn)生不同程度上的差異。
　　 除了菌株F12,其他與內(nèi)生真菌共生培養(yǎng)的植株較不接菌均體現(xiàn)了一定的優(yōu)勢。菌株F24b、B14、F25對原球莖小苗效果表現(xiàn)較好;壯苗植株接菌處理在共生培養(yǎng)10周時鮮重增長率較不接菌效果顯著;而生根植株接菌處理在共生培養(yǎng)7周時鮮重

6、增長率較不接菌均有不同程度上的提高。結(jié)果F24b對原球莖小苗和生根植株效果較好,F13和F25比較適于壯苗植株的培養(yǎng),而B14是對3個齡段的植株均有效的有益菌株。大棚移栽苗菌根化過程中美花石斛接菌較不接菌移栽后的長勢整體較好,以菌株F24a及B14對植株的短期、長期促生效果較好,且F12、F34、F13、B14號菌株的重分離率較高。
　　 (4)生境類型和植株大小是影響再引入后植株的成活率的主要因素:共生真菌對剛出瓶的菌根苗再引

7、入有較好的促進(jìn)成活的效果。
　　 在3個生境中,再引入后以歷史生境--生境2的植株總體成活情況和環(huán)境適應(yīng)性較好,可能適宜生境--生境3成活情況也較好,而美花石斛的現(xiàn)有生境--生境1的成活率卻較低,表明在一個地區(qū)移栽的蘭科植物實生苗的存活率與該地區(qū)本種植物的豐富度關(guān)系不大。隨著植株苗齡的增加,在相同監(jiān)測時段內(nèi)的同一生境中,植株再引入后的成活率呈相應(yīng)的增高。再引入3個月時對植株接菌與不接菌處理差異不大,菌株F24a與F9較其他菌處理