鐵皮石斛與美花石斛莖尖生長機理及其多糖累積規(guī)律研究.pdf

1、中藥石斛(Caulis Dendrobii)為來源于蘭科石斛屬多種植物,長期以來供需矛盾較為突出。石斛的來源植物生長緩慢,尤以細莖類的石斛如鐵皮石斛(Dendrobium candidum Wall Ex Lindl)、美花石斛(Dendrobium loddigesii Rolfe)等為甚;由于其生長緩慢、產量低,導致野生資源日漸稀少、人工栽培效益低而推廣困難。進行石斛的生長機理研究、促生長技術研究和藥材質量形成研究是解決上述問題的根

2、本途徑。
　　課題首先進行了本草考證,闡述了石斛藥材的藥用歷史,明確了古今藥名的一致性;品種考證探討了古今對應的石斛品種;闡述了石斛功效的歷史沿革;考證了本草記載并結合現代文獻明確了石斛的道地產區(qū)的多樣性。課題對石斛道地產區(qū)之一的廣西進行了石斛資源和生境調查。
　　通過鐵皮石斛、美花石斛莖尖細胞分裂節(jié)律研究,首次發(fā)現其晝夜均可進行細胞分裂,并發(fā)現了細胞分裂高峰期;其莖尖細胞分裂指數極低,是導致石斛生長緩慢的主要原因。

3、　　實驗對不同實驗組(噴施6-芐基氨基嘌呤(6-BA);特殊光照處理;對照組)鐵皮石斛、美花石斛莖尖分生組織分區(qū)研究。結果揭示了石斛莖尖分生組織細胞的分層和分區(qū)情況;探討了人工干預措施(噴施6-BA;特殊光照處理)對其的影響。
　　進行鐵皮石斛和美花石斛莖尖細胞死亡性質的研究。通過顯微、超微的細胞形態(tài)觀察,末端脫氧核苷酸轉移酶介導的生物素化的 dUTP切口末端標記(TUNEL法)以及吖啶橙熒光法研究發(fā)現,其莖尖細胞死亡性質屬于細胞

4、壞死。認為TUNEL法較適用于石斛莖尖細胞死亡性質的研究。
　　進行了鐵皮石斛和美花石斛莖尖細胞 ATP酶的顯微定位研究。實驗明確了ATP酶活性顯著的部位,揭示了不同階段、不同實驗處理的莖尖細胞 ATP酶的活性差異。
　　進行了鐵皮石斛和美花石斛的抗逆性研究。通過測定不同時期、不同實驗處理的石斛過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)的活性和丙二醛(MDA)的含量,研究其抗逆性及人工干預措施對其抗逆性的影響。實驗發(fā)現 PO

5、D、CAT活性,鐵皮石斛和美花石斛均以對照組為最低;MDA則以對照組為最高。鐵皮石斛激素組、物理組的POD、CAT活性,以及對照組CAT活性,均以5月最高,10月最低。美花石斛激素組、物理組的POD活性無月份差異,對照組則由5月、10、次年1月遞增。
　　首次研究了不同時期、不同實驗處理的鐵皮石斛與美花石斛葉片蔗糖合成酶活性,探討石斛生長過程的生理變化以及人工干預措施對其的影響。實驗發(fā)現5月份的蔗糖合成酶活性,兩種石斛均為對照組高