不同粗糙度的聚苯乙烯(PS)微球?qū)奘杉?xì)胞功能影響及其機(jī)制研究.pdf

1、目的：檢測聚苯乙烯（PS）微球的表面粗糙程度對巨噬細(xì)胞分泌IL-1β的影響及其機(jī)制。
　　方法：1.應(yīng)用微流控技術(shù)及乳液-溶劑揮發(fā)法制備尺寸均一，表面結(jié)構(gòu)可調(diào)控的不同粗糙程度微球，用掃描電鏡（SEM）及透射電鏡（TEM）對其表面形貌進(jìn)行表征；2.共聚焦顯微鏡下觀察了不同時(shí)間段Ana-1細(xì)胞系對不同粗糙程度微球的攝取和吞噬，并應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)對不同粗糙程度微球的吞噬率進(jìn)行了比較；3.用ELISA法檢測不同粗糙程度微球刺激Ana-1巨噬

2、細(xì)胞釋放炎性細(xì)胞因子IL-1β并比較其差異；4.腹腔注射入不同粗糙程度微球并用流式檢測中性粒細(xì)胞的募集，驗(yàn)證其在小鼠體內(nèi)引起的炎癥反應(yīng)；5.用PCR反應(yīng)驗(yàn)證微球刺激巨噬細(xì)胞引起NLRP3炎性復(fù)合體mRNA的變化。
　　結(jié)果：1.通過微流控技術(shù)及乳液-溶劑揮發(fā)法這種方法可以獲得表面粗糙程度可調(diào)控的尺寸均一的不同粗糙程度PS微球；2.共聚焦顯微鏡和流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合可以得出：PS微球在12h和24h不同時(shí)間段均可以被Ana-1細(xì)胞攝取吞噬

3、，不同粗糙程度微球被細(xì)胞吞噬率不同，并且粗糙微球周圍可以募集更多的Ana-1細(xì)胞；3.ELISA實(shí)驗(yàn)顯示出微球與巨噬細(xì)胞共孵育后，不同微球組與PBS組相比,刺激細(xì)胞釋放的IL-1β多（P<0.05），而粗糙微球組相對光滑微球組釋放量更高；4.體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明：微球可以刺激腹腔炎癥，募集中性粒細(xì)胞，因?yàn)槲⑶蚪M比陰性對照（PBS）組募集更多的中性粒細(xì)胞（P<0.05），而粗糙微球比光滑微球刺激的中性粒細(xì)胞募集量更多(P<0.05)；5.PCR反