硫化氫抑制儲藏病原菌生長的效應和機制研究.pdf

1、硫化氫(H2S)最早被認為是一種有毒有害氣體，但目前的研究表明，它在動植物的許多生理過程中都起重要的作用，是一個新型氣體信號分子。在延緩成熟衰老的研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)H2S能夠延緩多種果蔬的采后衰老與腐爛，但有關H2S與采后微生物之間關系的研究還很少。本論文以植物病原菌黑曲霉和食源性細菌大腸桿菌等微生物為主要材料，使用硫氫化鈉（NaHS）為H2S供體，考察了H2S對這些病原微生物生長的影響及其可能的機制。結果表明，H2S處理能顯著的延緩

2、黑曲霉和意大利青霉引起的采后蘋果、獼猴桃、梨、柑橘、甜橙和西紅柿腐敗。此外，H2S還能直接抑制黑曲霉和意大利青霉在培養(yǎng)基上的生長，抑制孢子萌發(fā)和萌發(fā)管伸長，引起菌絲體的結構異常甚至斷裂破碎。進一步的實驗表明，H2S處理誘導了黑曲霉胞內活性氧(ROS)的大量產生并引起了DNA氧化損傷。與此結果相應，H2S處理組黑曲霉體內超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化氫酶(CAT)的活性與基因表達也明顯比對照組低。
　　不僅如此，H2S還能顯著抑制

3、大腸桿菌、沙門氏菌、金黃色葡萄球菌和李斯特菌在培養(yǎng)基上的生長。H2S同樣也能夠抑制大腸桿菌SOD、CAT和谷胱甘肽還原酶(GR)酶活，降低GSH的含量，刺激胞內ROS的迸發(fā)，誘導抗氧化調節(jié)子SoxRS和OxyR應答，造成菌體的膜脂過氧化損傷和DNA氧化損傷。研究還發(fā)現(xiàn)，抗氧化劑抗壞血酸預處理能顯著緩解H2S對大腸桿菌的毒性，側面證明了H2S通過氧化損傷抑制大腸桿菌的生長。本文的結果還發(fā)現(xiàn)，H2S還能顯著抑制釀酒酵母、白色念珠菌、枯草芽孢

4、桿菌、蘇云金芽孢桿菌和產氣腸桿菌的生長，表明H2S抑制微生物生長的普遍性。并且通過復蘇實驗還發(fā)現(xiàn)，短時間的較高濃度的H2S處理能夠殺死微生物。
　　本論文還分別構建了黑曲霉CAT編碼基因catA和cpeB的敲除載體，并用PEG轉化法轉入黑曲霉原生質體，成功篩選得到了兩株突變體⊿catA和⊿cpeB。研究發(fā)現(xiàn)，突變體⊿catA與野生型相比對本實驗所用的H2O2和H2S脅迫的敏感性無明顯差異，而突變體⊿cpeB對H2O2和H2S脅迫都