新型功能化磷酸蛋白富集材料合成與性能研究.pdf

1、蛋白質(zhì)在生命活動中起著重要的作用，并且它是生命現(xiàn)象的直接體現(xiàn)者，在醫(yī)學(xué)中研究生理或病理的機制也都是建立在蛋白質(zhì)水平上的。與此同時，各種形式和行為活動的蛋白質(zhì)，如翻譯后修飾、蛋白質(zhì)之間的相互作用以及表現(xiàn)形式都需要我們對蛋白質(zhì)進(jìn)行進(jìn)一步研究。大多數(shù)的蛋白質(zhì)在翻譯后在不同的基團(tuán)會發(fā)生不同的修飾，例如磷酸化修飾。蛋白質(zhì)的選擇性和可逆性磷酸化修飾在生命活動的調(diào)節(jié)機制過程中起到了比較重要的作用，體內(nèi)中30-50％的蛋白質(zhì)都有可能受到可逆性磷酸化修飾

2、。在近些年，生物質(zhì)譜已經(jīng)取代一些傳統(tǒng)的手段作為研究磷酸化的分析技術(shù)，但是由于磷酸化蛋白的多樣性、磷酸化位點自然存在時間短以及相對較低的豐度使得磷酸化位點很難檢測到，因此開發(fā)一種更加有效分離和富集磷酸化蛋白質(zhì)的方法是十分有必要的。
　　本文是通過Stober法合成了單分散的二氧化硅微球，并通過衍生實驗在二氧化硅微球上嫁接雙鍵以形成二氧化硅材料的載體。另外，本實驗又合成了陰離子受體名為1-(3，5-二三氟甲基-苯基)-3-(4-乙烯基

3、苯基)脲的功能單體，并在交聯(lián)劑N，N-亞甲基雙丙烯酰胺以及引發(fā)劑引發(fā)作用下在二氧化硅載體表面修飾了一層聚合物，合成了一種能夠?qū)α姿峄鞍踪|(zhì)特異性吸附的新型硅球材料。通過傅里葉紅外光譜、透射電子顯微鏡對新型硅球材料SiO2@M2進(jìn)行表征，結(jié)果顯示新型硅球材料的直徑大約為210-220nm，其表面修飾有功能單體的聚合物層的厚度約為10nm。然后以經(jīng)典的磷酸化蛋白質(zhì)β一酪蛋白為模式蛋白來考察新型硅球材料SiO2@M2對于磷酸化蛋白質(zhì)的吸附性能

4、。研究結(jié)果表明，新型硅球材料SiO2@M2不僅對于β-酪蛋白這一種磷酸化蛋白質(zhì)具有較高吸附容量(對β-酪蛋白的吸附容量為92mg/g)，而且對于其它兩種磷酸化蛋白質(zhì)α-酪蛋白和雞卵白蛋白OVA均具有良好的吸附容量(對α-酪蛋白的吸附容量為40.2mg/g、對雞卵白蛋白OVA的吸附容量為36.3mg/g)，均高于其它非磷酸化蛋白質(zhì)的吸附容量（牛血清蛋白BSA的吸附容量為12.8mg/g、細(xì)胞色素C的吸附容量為6.28mg/g、牛血紅蛋白的